1 MỞ ĐẦU 1. Đặt vấn ñề Tây Nguyên vùng có tiềm năng dồi dào ñể phát triển nông lâm nghiệp, với trên 2 triệu ha ñất bazan màu mỡ, chiếm 60% diện tích ñất bazan của cả nước. Tây Nguyên là khu vực thích hợp cho phát triển cây công nghiệp hàng hoá như cà phê, cao su, hồ tiêu và cây lương thực là ngô. Theo số liệu thống kê năm 2008, Tây Nguyên có khoảng 470.000 ha cà phê, 144.000 ha cao su, 30.000 ha hồ tiêu và hàng trăm nghìn ha lúa, ngô và các cây công nghiệp ngắn ngày khác. Theo cơ cấu kinh tế năm 2009, nông nghiệp vẫn là ngành chủ ñạo trong phát triển kinh tế Tây Nguyên, trong ñó trồng trọt chiếm xấp xỉ 86% tổng sản phẩm và gần 35% tổng kinh tế toàn vùng. Có ñược những thành công trên là do có sự thay ñổi cơ cấu cây trồng, áp dụng những thành tựu khoa học - kỹ thuật vào quá trình sản xuất, tăng cường ñầu tư thâm canh… Một trong những biện pháp thâm canh ñem lại hiệu quả cao là tăng cường sử dụng các loại phân hoá học, việc ñó ñã làm tăng ñáng kể năng suất và chất lượng nông sản. Nhưng mặt trái của việc sử dụng phân bón hoá học là làm cho ñất ngày càng bị thoái hoá, chua hoá, chai cứng, ñồng thời làm cho hệ vi sinh vật có ích trong ñất ngày càng giảm ñi một cách nhanh chóng. Photphat là một trong nguyên tố dinh dưỡng ña lượng quan trọng, cần thiết cho sự sinh trưởng và phát triển của cây trồng như tổng hợp ATP nguồn năng lượng cho mọi hoạt ñộng sống của cơ thể và cấu tạo acid nucleic. [2] Trong tự nhiên sự chuyển hoá photphat xảy ra chủ yếu dưới tác dụng của quá trình hoá học và sinh học [1]. Quá trình chuyển hoá hợp chất photphat khó tan trong ñất có phần ñóng góp quan trọng của các loại vi sinh vật. 2 Nhóm vi sinh vật phân giải photphat khó tan tồn tại nhiều trong ñất và cùng các loại vi sinh vật khác luôn giữ cho hệ vi sinh vật trong ñất ñược cân bằng sinh thái và dịch bệnh xảy ra nếu sự cân bằng bị phá vỡ. Các vi sinh vật phân giải photphat khó tan trong ñất hoạt ñộng như các nhà máy phân lân chuyển quặng khó tan thành dễ tan ñể cây trồng hấp thụ ñược, không cần axit mạnh và nhiệt ñộ cao. Do vậy bón vi sinh vật phân giải photphat khó tan vào ñất sẽ cung cấp một lượng photphat dễ tan cho cây trồng, không làm chua ñất và giúp cây hấp thụ các chất dinh dưỡng trong ñất tốt hơn [14]. Một số nghiên cứu trên thế giới ñã chỉ ra một số vi sinh vật có khả năng thể hiện ñược nhiều các hoạt tính sinh học khác nhau, trong ñó có những vi sinh vật vừa chuyển hoá hợp chất photphat vừa có khả năng tạo các chất dinh dưỡng cho cây, sinh tổng hợp chất kích thích sinh trưởng thực vật ñồng thời cũng có khả năng ức chế một số vi sinh vật gây bệnh vùng rễ cây trồng [3,6]. Đắk Lắk với hơn 310.000 ha là ñất bazan nâu ñỏ là loại ñất có hàm lượng lân tổng số cao nhưng hàm lượng lân dễ tiêu thấp do sự di ñộng của Fe, Al, hay hàm lượng Ca 2+ cao dẫn ñến lân dễ bị cố ñịnh thành lân khó tiêu ( Ca 3 (PO 4 ) 2 , AlPO 4 , FePO 4 ) nên lượng lân dễ tiêu luôn ở mức nghèo[25]. Đất bazan nâu ñỏ rất thích hợp cho việc phát triển các cây công nghiệp dài ngày, nhưng trong nhiều năm qua nông dân thường chỉ dùng phân hoá học ñể bón cho cây trồng thiếu bón phân hữu cơ cũng như phân vi sinh vật làm cho ñất trồng bị thoái hoá, chai cứng, vi sinh vật ñất bị suy thoái, gây ô nhiễm môi trường. Xuất phát từ những lý do trên chúng tôi tiến hành nghiên cứu ñề tài Nghiên cứu phân lập và tuyển chọn vi khuẩn phân giải photphat khó tan trên ñất bazan nâu ñỏ ở ĐakLak . 3 2. Mục tiêu của ñề tài - Phân lập các chủng vi khuẩn phân giải photphat khó tan trên ñất bazan nâu ñỏ ở Đăk Lăk. - Tuyển chọn các chủng có hoạt tính phân giải photphat khó tan cao của các chủng vi khuẩn. 3.Ý nghĩa khoa học Kết quả nghiên cứu của ñề tài góp phần làm sáng tỏ vai trò của vi sinh vật phân giải photphat khó tan . Các nghiên cứu của thế giới và Việt Nam về phân giải photphat khó tan dạng photphat sắt, photphat nhôm còn rất ít nghiên cứu. Đáng chú ý ñề tài nghiên cứu, tuyển chọn và phân lập các chủng vi khuẩn có khả năng phân giải photphat khó tan hiệu quả trên ñất bazan nâu ñỏ trong ñiều kiện cụ thể ở Đak Lak và góp phần bảo tồn nguồn gen vi sinh vật bản ñịa hữu ích. 4. Ý nghĩa thực tiễn Thành công của ñề tài sẽ góp phần vào việc sản xuất và ứng dụng chế phẩm vi sinh vật phân giải photphat khó tan trong sản xuất nông , lâm nghiệp nhằm cung cấp photphat dễ tan cho cây trồng, giảm chi phí ñầu tư, giảm sự thoái hoá ñất, góp phần cải thiện ñời sống của nông dân và bảo vệ môi trường nông thôn ở Đak Lak. 5. Giới hạn của ñề tài Trong quá trình thực hiện, do thời gian, trang thiết bị, hoá chất có hạn nên chúng tôi chỉ tiến hành phân lập trên một số mẫu ñất của tỉnh Đak Lak và chỉ theo dõi một số chỉ tiêu cơ bản. Mặt khác, ñây là lần ñầu tham gia nghiên cứu nên không thể tránh khỏi thiếu sót. Kính mong quý thầy cô và các bạn ñóng góp ý kiến. 4 CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 1.1. Các dạng lân trong tự nhiên Photphat là nguyên tố ñóng vai trò ñặc biệt trong quá trình trao ñổi chất của cây, tham gia vào việc hình thành tế bào, acid nucleic, làm nhanh quá trình chín ở cây, các quá trình phân giải protein và các sản phẩm trung gian ở trong lá ñược tăng cường và chuyển ñến các cơ quan vào hạt, làm tăng sự phát triển ở rễ. Nếu trong ñất chỉ có nitơ mà không ñủ photphat thì cây không phát triển tốt ñược [29]. Tuy nhiên hiệu suất sử dụng photphat bởi cây trồng không quá 25% , trong khi ñó một lượng lớn bị cố ñịnh trong ñất và chuyển thành dạng khó hấp thụ. Lượng dự trữ của photphat trong ñất xấp xỉ 0,025 – 0,3% P 2 O 5 nhưng chúng tồn tại trong ñất ở dạng không tan trong nước nên cây khó hấp thụ. Lượng lân trong ñất nhiều hay ít là do tính chất ñá mẹ, thành phần cơ giới và hàm lượng chất hữu cơ quyết ñịnh [22]. Theo Sepfe-Satsaben (1960) thì hàm lượng lân trung bình ở nhiều loại ñất thường từ 0,02 - 0,08%. Do quá trình tích luỹ sinh học, hàm lượng lân trong lớp ñất mặt cao hơn ở lớp dưới. Trong các loại ñất khoáng, tỉ lệ lân hữu cơ thường từ 25 - 65%. Các cỡ hạt thuộc thành phần sét thường chứa nhiều lân hơn các cỡ thuộc thành phần cát. Do ñó: Ở các chân ñất nhẹ, ñất bạc màu… có ít keo sét, thì tỉ lệ lân thường thấp hơn các chân ñất khác. Ở Việt Nam, tỉ lệ lân trong ñất khác nhau tuỳ theo tính chất của ñá mẹ và những ñất phát sinh từ ñá mẹ chua như: Nai, mica, quartzit, … thường tỉ lệ lân thấp hơn là ñất phát sinh từ mẫu thạch không chua như: Bazan, ñá vôi,… 5 Như vậy, bón phân lân và tăng cường ñộ hoà tan các dạng lân khó tiêu là biện pháp rất quan trọng trong sản xuất nông nghiệp. Bón phân hữu cơ, vùi xác ñộng vật thực vật vào ñất ở mức ñộ nhất ñịnh cũng là biện pháp tăng cường hàm lượng lân cho ñất [27]. Trong tự nhiên nói chung và trong ñất nói riêng, lân thường ở các dạng chủ yếu như sau: 1.1.1. Lân hữu cơ Hàm lượng lân hữu cơ trong ñất chiếm một tỉ lệ cao khoảng 20 - 80% lân tổng số. Ở lớp ñất mặt, lân chiếm khoảng 50% [22]. Lân hữu cơ trong ñất chủ yếu ở trong thành phần mùn. Đất càng giàu mùn thì càng giàu lân hữu cơ. Theo Kletcôpxki và Petecbuaxki (1964) thì: Trong lân hữu cơ của ñất dạng phổ biến nhất là dạng fytat, có thể chiếm ñến 50% tổng số lân hữu cơ. Tuỳ theo môi trường chua hay kiềm mà tồn tại ở các dạng fytat khác nhau. Ở ñất chua, lân hữu cơ chủ yếu là fytat Fe, Al; ở ñất trung tính, kiềm tồn tại dạng phytat Ca, Mg. Lân hữu cơ trong cơ thể ñộng vật, thực vật, vi sinh vật thường gặp các hợp chất chủ yếu như phytin, photpholipit, axit nucleic. Điều ñáng chú ý là lân ở tế bào vi sinh vật thì không trực tiếp tham gia vào việc dinh dưỡng cây trồng ñược và phải ñợi vi sinh vật chết ñi, tế bào bị khoáng hoá cây mới hút ñược [7]. Khi thực hiện quá trình khoáng hoá có sự tham gia của vi sinh vật phân giải lân, những hợp chất hữu cơ (trong ñó có lân hữu cơ) sẽ ñược khoáng hoá ñể giải phóng ra lân vô cơ hay lân hữu cơ, là nguồn dinh dưỡng cung cấp thức ăn cho cây trồng. Có 70 - 80 tập ñoàn vi sinh vật tham gia vào quá trình phân giải lân. Trong quá trình khoáng hoá chất hữu cơ của ñất, lân hữu cơ ñược giải phóng ra dưới dạng photphoric và muối dễ tan của nó. Nhưng các dạng lân này lại bị ñất hấp phụ và bị vi sinh vật hút lại, nên trong ñất rất ít lân ở thể hoà tan. Nhiều tác giả 6 nghiên cứu cho rằng: Nếu chất hữu cơ vùi trong ñất là chất hữu cơ nghèo lân thì qua quá trình phân giải không những hàm lượng lân hữu cơ trong ñất không tăng lên mà còn sụt xuống (Ivanop 1955). Theo những công trình nghiên cứu của Kaila (1954) nếu chất hữu cơ vùi xuống ñất chứa ít hơn 0,2 - 0,3% P 2 0 5 thì quá trình phân giải không có tăng thêm về lân dễ tiêu cho cây vì vi sinh vật hút hết. Cường ñộ hút lân hữu cơ của ñất thông qua sự phân giải của vi sinh vật phụ thuộc rất nhiều vào nhiệt ñộ. Theo Sepfe-Satsaben (1960) trong ñiều kiện nhiệt ñộ bình thường, ở các nước ôn ñới, sự khoáng hoá lân hữu cơ tiến hành rất chậm và lượng lân cung cấp cho cây từ những hợp chất hữu cơ không ñáng kể. Trái lại, ở nhiệt ñộ từ 35 - 50 0 C thì quá trình khoáng hoá ñó tăng lên rất mạnh và cung cấp cho cây ñược nhiều lân từ những hợp chất hữu cơ. Vì thế, ở nước ta bón phân chuồng cũng có khả năng giải quyết ñược phần nào những triệu chứng thiếu lân của cây. 1.1.2. Lân vô cơ Lân vô cơ tồn tại ở dạng muối của những nguyên tố Ca, Fe, Al. Ở ñất trung tính và ñất kiềm thì photphat Ca là chủ yếu, còn ở ñất chua thì photphat Fe, Al là chủ yếu. Photphat Ca dễ ñược huy ñộng ñể làm thức ăn cho cây hơn là photphat Fe, Al. Sự tồn tại của ion photphat trong môi trường ñất bị chi phối bởi ion photphat bị chuyển ñổi hoá trị. Trong thực tế, H 2 PO 4 - là dạng cây trồng dễ hấp thu nhất. Các dạng lân còn lại thường là những loại khó hoà tan mà cây trồng không thể ñồng hoá ñược, muốn cây trồng sử dụng ñược phải qua chế biến, biến chúng thành dạng dễ tan. Cũng như các yếu tố khác, lân trong tự nhiên luôn luôn tuần hoàn chuyển hoá. Nhờ vi sinh vật, lân hữu cơ ñược vô cơ hoá biến thành dạng muối của axit photphoric. Các dạng lân này một phần ñược cây trồng sử dụng biến thành dạng lân hữu cơ, một phần bị cố ñịnh dưới dạng khó tan như Ca 3 (PO 4 ) 2 , FePO 4 , AlPO 4 . Những dạng khó tan này trong các môi trường có pH thích 7 hợp sẽ chuyển hoá và biến thành dạng dễ tan. Trong quá trình này vi sinh vật giữ vai trò quan trọng [4]. 1.1.3. Vòng tuần hoàn lân trong tự nhiên Vòng tuần hoàn của lân không giống như vòng tuần hoàn của nitơ. Trong khi nitơ luôn khan hiếm trong ñất thì lân tồn tại nhiều trong ñất ở dạng khó phân giải [2,14]. Nitơ ñược ñưa vào ñất nhờ vi sinh vật cố ñịnh ñạm từ không khí, còn ñối với lân, chúng ñược các vi sinh vật phân giải từ các nguồn lân vô cơ và hữu cơ khác nhau. Vòng tuần hoàn của lân ñược biểu diễn trong sơ ñồ sau: 1.2. Sự chuyển hoá lân trong ñất 1.2.1. Đối với lân hữu cơ Tuỳ loại ñất tỷ lệ hữu cơ thường chiếm từ 20 - 80% lân tổng số trong ñất. Trong tầng ñất mặt, lân hữu cơ thường chiếm 50% tổng số lân trong ñất. Trong ñất, nhiều loại vi khuẩn và nấm có thể phân huỷ các Cây xanh Động vật PO 4 3 - trong dung dịch ñất PO 4 3- bị hấp thụ Hòa tan Lân vô cơ Cố ñịnh tạm thời Chất hữu cơ tươi và tế bào sinh vật Ch ất hữu c ơ mùn hóa Quá trình khoáng Quá trình cố ñịnh 8 chất hữu cơ phức tạp ñể giải phóng lân dưới dạng vô cơ. Myskow cho rằng 70 - 80 tập ñoàn vi sinh vật ñất có khả năng khoáng hoá lân hữu cơ. Các vi sinh vật ñất tiết ra các enzyme khử photphoryl ñồng thời giải phóng ion photphat. Phản ứng men nhanh khi nó tác ñộng ñến các chất vừa mới bón vào ñất, phản ứng men chậm lại khi hợp chất lân ñã cải biến và phát triển trong ñất bằng cách tạo thành các phức liên kết với Fe, Al, các chất hữu cơ phân tử lượng cao như: Các dẫn xuất của phytin, axit nucleic , và bị giữ chặt trên các phần tử sét trong ñất. Tốc ñộ giải phóng lân phụ thuộc vào b ản chất các hợp chất hữu cơ có lân: Axit nucleic dễ khoáng hoá hơn phytin. Nguyên nhân do hầu hết các vi sinh vật khoáng hoá lân hữu cơ ñều tiết ra các enzyme tương ứng ñể phân giải axit nucleic [19]. Nếu lượng C/P cao hơn 300 thì lân sẽ bị các vi sinh vật trong ñất cố ñịnh. Còn ở mức C/P nhỏ hơn 200, lân sẽ thừa nên ñược khoáng hoá [19]. pH tối thích là 6 – 7. Ở môi trường kiềm lân vô cơ ñược phóng thích nhanh hơn lân hữu cơ [19]. - Nhiệt ñộ cao cũng thuận lợi cho việc khoáng hoá lân hữu cơ. Tối thích là 40 – 50 o C. Do ñó trong mùa hè tốc ñộ khoáng hoá lân mạnh hơn các mùa khác [19]. 1.2.2. Đối với lân vô cơ Sự tồn tại các loại ion photphat trong ñất phụ thuộc vào pH ñất. Do vậy, thực tế trong ñất, lân tồn tại chủ yếu ở hai dạng: H 2 PO 4 - và HPO 4 2- . H 2 PO 4 - HPO 4 2- PO 4 3- Ở pH = 7 tỷ lệ 2 loại ion này gần bằng nhau. H 2 PO 4 - dễ ñồng hoá hơn HPO 4 2- , nên về mặt lý thuyết ở pH = 5 – 6 dinh dưỡng lân của cây thuận lợi nhất. Song trong ñất do có mặt của nhiều ion khác mà vấn ñề trở nên phức tạp hơn. Dung dịch acid Dung dịch kiềm 9 1.2.2.1. Sự chuyển hoá lân ở ñất chua Trong ñất chua nghèo chất hữu cơ: Fe, Al và Mn thường nằm dưới dạng hoà tan phản ứng với H 2 PO 4 - tạo thành hợp chất không tan cây không ñồng hoá ñược Al 3+ + H 2 PO 4 - + 2H 2 O 2H + + Al(OH) 3 .H 2 PO 4 Ở các loại ñất rất chua, Al 3+ và Fe 3+ vượt các ion H 2 PO 4 - nhiều làm cho phản ứng trên càng nghiêng theo chiều thuận, tạo thành lân không tan khiến cho chỉ còn một lượng rất nhỏ H 2 PO 4 - trong ñất. Ở ñất chua, ion H 2 PO 4 - không những phản ứng với Fe 3+ , Al 3+ hoà tan mà còn phản ứng với các oxit ngậm nước của các nguyên tố ñó như gibbsit (Al 2 O 3 .3H 2 O) và goethit (Fe 2 O 3 .3H 2 O). Ở ñất chua số lượng lân bị các oxit sắt, oxit nhôm ngậm nước cố ñịnh còn vượt quá cả số lượng lân bị kết tủa với Fe, Al và Mn hoà tan. Al(OH) 3 + H 2 PO 4 - Al(OH) 2 .HPO 4 - + H 2 O Điều ñáng lưu ý là hầu hết các loại ñất ñều chứa oxit sắt, nhôm ngậm nước nên ñây cũng là kiểu cố ñịnh khá nhiều lân và diễn ra trên phạm vi rộng. Trong môi trường chua còn có hai quá trình cố ñịnh lân liên quan tới sét. Đó là do sự tồn tại các ion OH - lộ trên bề mặt khoáng sét. Sự cố ñịnh này ñi kèm với việc giải phóng kiềm theo phản ứng sau: Sét – OH + Ca(H 2 PO 4 ) 2 sét – H 2 PO 4 - +1/2Ca(OH) 2 Khả năng cố ñịnh thay ñổi theo bản chất khoáng vật của keo sét theo thứ tự sau ñây: Illit > Kaolinit > Montmorillonit. [Al] + H 2 PO 4 - + 2H 2 O 2H + + Al(OH) 2 .H 2 PO 4 Không tan 10 Vai trò của sắt và nhôm thể hiện qua thực tế là việc cố ñịnh các anion mạnh lên khi tỉ lệ SiO 2 /seoquioxit giảm, với các loại ñất ñã mất vôi nếu các seoquioxit cũng mất ñi thì khả năng cố ñịnh lân cũng giảm. Về vai trò của can xi, người ta thấy khi ñể cho sét hấp thụ Ca 2+ , tỉ lệ anion photphat ñược hấp thu tăng lên, bất chấp ngưỡng kết tủa canxi photphat. Điều ñó chứng tỏ rằng ñây là quá trình cố ñịnh ion chứ không phải bằng con ñường hoá học. Tính ổn ñịnh của quá trình giữ chặt này phụ thuộc vào ñiều kiện môi trường và việc giải phóng anion có thể xảy ra khi ñiều kiện môi trường thay ñổi và ñặc biệt là nếu sét bị giải keo. Ở ñất chua, các hydroxit sắt, nhôm lưỡng tính có thể mất 1 nhóm OH - trở thành keo dương tính tham gia hấp phụ trao ñổi anion: Al(OH) 3 + H + = Al(OH) 2 + + H 2 O 1.2.2.2. Sự chuyển hoá lân ở ñất kiềm Trong môi trường kiềm giàu Ca, ion H 2 PO 4 - phản ứng mạnh với Ca tạo thành các hợp chất ít tan hơn theo các phản ứng lần lượt như sau [29]: Ca(H 2 PO 4 ) 2 + CaCO 3 + H 2 O → 2CaHPO 4 .2H 2 O + CO 2 6CaHPO 4 .2H 2 O + 2CaCO 3 + H 2 O → Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6 .5H 2 O + 2CO 2 Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6 .5H 2 O + CaCO 3 → Ca 3 (PO 4 ) 2 + CO 2 + 6H 2 O Lân trở nên kém hoà tan hơn khi gặp ñiều kiện thuận lợi và ñủ thời gian Ca 3 (PO 4 ) 2 có thể chuyển thành các hợp chất không tan hơn nữa như hydroxy, cacbon và ngay cả fluoro apatit. 1.3 Tổng quan về vi sinh vật phân giải lân Vi sinh vật (microorganisms) là tên chung dùng ñể chỉ tất cả các loại sinh vật nhỏ bé chỉ có thể quan sát bằng kính hiển vi. Theo Hoàng Lương Việt (1978) trung bình một gam ñất khô có ñến gần 200 triệu tế bào vi sinh vật. Vi sinh vật có các nhóm chính sau: vi khuẩn, xạ khuẩn, nấm men, nấm mốc, vi [...]... CHƯƠNG2 N I DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 N i dung nghiên c u t ư c m c tiêu tài t ra , chúng tôi ã ti n hành nghiên c u các n i dung sau: 2.1.1 Phân l p và tuy n ch n các ch ng vi khu n phân gi i photphat khó tan trên t bazan nâu 2.1.2 ak Lak ánh giá ho t tính phân gi i photphat khó tan c a các ch ng vi khu n 2.1.3 Xây d ng quy trình nuôi c y vi khu n phân gi i photphat khó tan - Nghiên c u v thành... các cơ quan khoa h c và s n xu t trong c nư c 1.9 Tình hình nghiên c u vi sinh v t phân gi i photphat khó tan 1.9.1 Tình hình nghiên c u trên th gi i Vi c nghiên c u vi sinh v t phân gi i photphat ã ư c quan tâm m t s nư c trên th gi i H ã nghiên c u và ng d ng nhi u ch ng vi sinh v t phân gi i photphat trong s n xu t nông nghi p Các ch ng vi khu n c bi t thu c loài Pseudomonas và Bacillus, các ch ng... môi trư ng - Nghiên c u nh hư ng c a pH - Nghiên c u nh hư ng c a t c l c - Nghiên c u nh hư ng c a th i gian nuôi c y 2.1.4 Nghiên c u th nghi m nh hư ng c a các ch ng phân gi i photphat khó tan tuy n ch n trên cây lúa tr ng trong ch u 2.2 Phương pháp nghiên c u 2.2.1 i tư ng, a i m nghiên c u i tư ng nghiên c u: Ch ng vi khu n phân gi i photphat khó tan thu th p trên t ak Lak: t bazan nâu (Rhode ferrasol),... methyl blue và quan sát b ng kính hi n vi quang h c phóng i 40x ,100x 2.2.2.4 Phương pháp th nghi m ho t tính phân gi i photphat khó tan c a các ch ng vi sinh v t tuy n ch n trên ngu n AlPO4 khó tan S d ng môi trư ng NBRIP v i ngu n photphat khó tan ư c thay i là AlPO4 (3,9g/l) Th c hi n 2 lô thí nghi m: - Lô 1: s d ng ngu n photphat khó tan là Ca3(PO4)2 Môi trư ng ư c phân ph i vào 9 ng nghi m và m i ng... ng phân l p ch ng vi khu n phân gi i photphat khó tan là môi trư ng t i thi u NBRIP (Perez, 2007)[44] Thành ph n môi trư ng g m: 5,0 g Ca3(PO4)2; 0,25g MgSO4; 0,2g KCl; 0,1g (NH4)2SO4; 5 g MgCl2.6 H2O; 10g glucose; 20g agar tinh s ch; 1lit nư c c t Kh trùng 121oC trong 20 phút Khi phân l p vi khu n phân gi i photphat khó tan b ng cách nuôi c y trên môi trư ng NBRIP, vi khu n phân gi i photphat khó tan. .. ,ti t ki m phân bón vô cơ và góp ph n t o cân b ng sinh thái Phân bón vi sinh có ý nghĩa quan tr ng trong vi c b o v môi trư ng và xây d ng n n nông nghi p s ch 23 b n v ng, do v y vi c nghiên c u s d ng r ng rãi phân bón vi sinh trong nông lâm nghi p ã và ang ư c nhi u nư c trên th gi i quan tâm phát tri n[13] Các lo i bón phân vi sinh ang ư c th gi i nghiên c u và s d ng có th k n là: Phân vi sinh c... 10 ch ng VSV hoà tan photpho và nh n th y r ng ngoài kh năng hoà tan photpho khó tan các ch ng VSV này có kh năng s n sinh enzyme photphataza (ch y u là n m s i và vi khu n) enzyme này óng vai trò xúc tác không th thi u cho 27 quá trình phân hu sinh h c các h p ch t h u cơ ch a photphat Vũ thuý Nga (2003) nghiên c u kh năng sinh t ng h p IAA và phân gi i photphat vô cơ khó tan c a vi khu n Bradyrhizobium... (2007) c n nghiên c u s d ng ph i h p các ch ng vi khu n nh N và vi khu n phân gi i photphat khó tan ã làm tăng năng su t lúa n 20% so v i i ch ng 1.9.2 Tình hình nghiên c u trong nư c Nh m m c tiêu phát tri n nông nghi p sinh thái b n v ng Vi t Nam ã có khá nhi u nghiên c u v vi sinh v t phân gi i lân Th p k 90 th k XX các vi sinh v t phân gi i lân sau khi ư c nhân sinh kh i ư c t m nhi m vào ch t mang... 1992) Perez (2007) ã nghiên c u phân l p ư c 130 ch ng vi khu n có kh năng phân gi i photphat khó tan Venezuela Tuy nhiên, không có ch ng nào có ho t tính phân gi i photphat Fe và Al Tác gi cũng ch n ư c 10 ch ng có ti m năng nghiên c u ti p thu c các chi Ralstonia, Pantoea, Serrati [44] Alvaro (2009) ã phân l p ư c 2 ch ng vi khu n t r c Tây Ban Nha có ho t tính phân gi i photphat và kích thích sinh... h p gi a ch ng Azotobacter sp v i các vi khu n phân gi i photphat thu c các chi Agrobacterium sp, Bacillus sp và Pseudomonas sp…[41] Nh ng vi sinh v t này có vai trò vô cùng quan tr ng i v i s n xu t nông, lâm nghi p và con ngư i .Vi sinh v t phân gi i lân ư c chia thành 2 nhóm: Vi sinh v t phân gi i lân h u cơ và vi sinh v t phân gi i lân vô cơ 1.3.1 Vi sinh v t phân gi i lân h u cơ S chuy n hoá các . trên chúng tôi tiến hành nghiên cứu ñề tài Nghiên cứu phân lập và tuyển chọn vi khuẩn phân giải photphat khó tan trên ñất bazan nâu ñỏ ở ĐakLak . 3 2. Mục tiêu của ñề tài - Phân lập. Phân lập các chủng vi khuẩn phân giải photphat khó tan trên ñất bazan nâu ñỏ ở Đăk Lăk. - Tuyển chọn các chủng có hoạt tính phân giải photphat khó tan cao của các chủng vi khuẩn. 3.Ý nghĩa. rất ít nghiên cứu. Đáng chú ý ñề tài nghiên cứu, tuyển chọn và phân lập các chủng vi khuẩn có khả năng phân giải photphat khó tan hiệu quả trên ñất bazan nâu ñỏ trong ñiều kiện cụ thể ở Đak