Viện khoa học và công nghệ việt nam Viện tài nguyên và môi trờng biển 0o0 Đề tài cấp nhà nớc kc-09-19 Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra Chủ nhiệm đề tài: TS. Chu Văn Thuộc Báo cáo chuyên đề ảnh hởng một số yếu tố môi trờng tới sự phát triển của một số loài tảo giáp độc hại trong điều kiện phòng thí nghiệm Ngời thực hiện: Phạm Thế Th, Nguyễn Thị Minh Huyền, Trần Mạnh Hà Nguyễn Thị Thu Phòng Sinh vật phù du và Vi sinh vật Biển Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển Tel. (031) 565 495 Fax. (031) 761 521 e-mail: Planktondept@imer.ac.vn 6132-24 02/10/2006 Hải Phòng, tháng 4/2006 Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________ Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP. Hải Phòng Mục Lục Mục Lục i Danh mục các chữ viết tắt ii i. Mở Đầu 1 II. Phơng pháp nghiên cứu 2 2.1. Đối tợng nghiên cứu 2 2.2. Phơng pháp nghiên cứu 2 2.2.1. Phơng pháp thu mẫu tảo độc hại (tảo sống) ngoài hiện trờng 2 2.2.2. Phơng pháp phân lập, làm sạch và giữ giống tảo trong điều kiện phòng thí nghiệm 2 2.2.2.1. Phơng pháp phân lập và làm sạch 2 2.2.2.2. Phơng pháp giữ giống tảo độc hại trong phòng thí nghiệm 3 2.2.3. Phơng pháp thiết kế thí nghiệm 3 2.2.3.1. Thí nghiệm ảnh hởng của cờng độ ánh sáng tới sự phát triển của tảo 3 2.2.3.2. Thí nghiệm ảnh hởng của độ mặn tới sự phát triển của tảo 4 2.2.3.3. Thí nghiệm ảnh hởng nhiệt độ tới sự phát triển của tảo 4 2.2.3.4. Thí nghiệm ảnh hởng của muối dinh dỡng tới sự phát triển của tảo 4 2.2.3 Phơng pháp xử lý số liệu 4 III. Kết quả và thảo luận 6 3.1. Phân lập, nuôi thành công một số loài tảo và sự phát triển của vi tảo 6 3.1.1. Phân lập và nuôi thành công một số loài tảo 6 3.1.2. Sự phát triển của tảo 6 3.2. ảnh hởng của cờng độ ánh sáng tới sự phát triển của tảo 7 3.2.1. Chi tảo Alexandrium 7 3.2.1.1. Loài tảo Alexandrium affine 7 3.2.1.2. Loài tảo Alexandrium minutum 9 3.2.2. Chi tảo Prorocentrum 10 3.2.2.1. Loài tảo Proroxentrum cf. mexicanum. 10 3.3. ảnh hởng của độ mặn tới sự phát triển của tảo 11 3.3.1. Chi tảo Alexandrium 11 3.3.1.1. Loài tảo Alexandrium affine 11 Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________ Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP. Hải Phòng 3.3.1.2. Loài tảo Alexandrium minutum. 13 3.3.1.3. Loài tảo Alexandrium tamarense. 14 3.3.2. Chi tảo Prorocentrum 15 3.3.2.1. Loài tảo Prorocentrum cf. mexicanum 15 3.3.2.2. Loài tảo Prorocentrum micans 16 3.4. ảnh hởng của nhiệt độ tới sự phát triển của tảo 18 3.4.1. Chi tảo Alexandrium 18 3.4.1.1. Loài tảo Alexandrium minutum 18 3.4.1.2. Loài tảo Alexandrium affine 19 3.4.2. Chi tảo Prorocentrum 21 3.4.2.1. Loài tảo Prorocentrum cf. mexicanum. 21 3.4.2.2. Loài tảo Prorocentrum micans. 22 3.5. ảnh hởng nồng độ muối dinh dỡng tới sự phát triển của tảo 24 3.5.1. ảnh hởng của muối nitrat - NO 3 - tới sự phát triển của tảo 25 3.5.1.1. Loài tảo Alexandrium minutum 25 3.5.1.2. Loài tảo Prorocentrum cf. mexicanum 29 3.5.2. ảnh hởng của muối phốt phát - PO 4 -3 tới sự phát triển của tảo 34 3.5.2.1. Loài tảo Alexandrium minutum 34 3.5.2.2. Loài tảo Prorocentrum cf. mexicanum. 38 3.6. Vài nhận định về khả năng thúc đẩy sự bùng phát mật độ tảo của một số yếu tố môi trờng chính. 42 IV. Kết luận và kiến nghị 45 4.1. Kết luận 45 4 2. Kiến nghị 45 Tài liệu tham khảo 47 5.1. Tài liệu tiếng Việt 47 5.2. Tài liệu tiếng Anh: 48 Phụ Lục 50 Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP. Hải Phòng Danh sách các chữ viết tắt ADN : Axit dinucleic CĐAS : Cờng độ ánh sáng TDPCTB: Tốc độ phân chia tế bào ANOVA : Phân tích phơng sai (Analysis of Variance) TN : Thí nghiệm Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP. Hải Phòng 1 I. Mở đầu Trong các thuỷ vực có nhiều loài tảo có khả năng sản sinh độc tố gây các chứng bệnh về thần kinh và tiêu hoá ở ngời. Nhiều loài tảo khác tuy không chứa độc tố nhng khi bùng phát về số lợng cá thể lại gây hại tới các sinh vật khác và hệ sinh thái. Những loài tảo mang một hoặc cả hai đặc điểm trên đợc gọi là tảo độc hại. Sự nở hoa của tảo độc hại (Thuỷ triều đỏ) là một hiện tợng tự nhiên và với mật độ lên tới hàng triệu tế bào/lít nó đã và đang gây nhiều thiệt hại về kinh tế, sức khoẻ con ngời và ảnh hởng mạnh mẽ đến môi trờng và sinh thái. Đặc biệt sự xuất hiện của chúng đang ngày càng gia tăng cả về tần số xuất hiện và phân bố địa lý. Trong tổng số khoảng 5000 loài thực vật phù du biển đã đợc phát hiện, có khoảng 300 loài có khả năng gây thuỷ triều đỏ [Souria, 1995], khoảng 1/4 trong số đó có khả năng sản sinh độc tố đang là mối đe doạ, thậm chí có thể tàn phá khu hệ động, thực vật bao gồm cả sự thiệt hại về con ngời. Khi nở hoa chúng làm cạn kiệt ôxy hoặc làm tăng hàm lợng amoniac trong thuỷ vực, gây tắc nghẽn và phá huỷ mang cá Hàng năm trên thế giới có khoảng 2000 ngời bị ngộ độc (số ngời chết chiếm 15%) do ăn phải động vật nhuyễn thể, cá đã nhiễm độc tố tảo [Hallegraeff et al.1995]. Trong các năm từ 1987 đến 1991, tại vùng biển Seto Inland và Kyu Syu (Nhật Bản) đã có hàng ngàn trờng hợp bùng phát tảo độc hại với thiệt hại lên tới vài tỷ yên [Andersen 1996], Gần đây, vào tháng 3; 4 năm 1998, sự bùng nổ của tảo Gyrodinium, Alexandrium và Cochlodinium ở vùng biển Hồng Kông đã ảnh hởng nghiêm trọng tới 2/3 nghề nuôi cá lồng ở khu vực này và gây thiệt hại khoảng 42 triệu đô la Mỹ. Cũng nh các nớc trên thế giới, Việt Nam cũng đã từng bị thiệt hại nặng nề do hiện tợng thuỷ triều đỏ gây nên, ví dụ nh ở vịnh Văn Phong - Bến Gỏi sự bùng phát của tảo Noctiluca vào các tháng 5;6 năm 1995 đã làm cho các trại nuôi tôm hùm trong khu vực bị thiệt hại hàng tỷ đồng [Nguyễn Ngọc Lâm và cộng sự, 1996]. Trong tháng 7 năm 2002, tảo Phaeocystis gây hiện tợng thuỷ triều đỏ trải dài khoảng 30 km ở biển Bình Thuận đã huỷ diệt hầu hết các loài thuỷ sinh vật trong vùng bị tác động [Báo tuổi trẻ số 31-2002/ngày 11-8-2002]. Sự gia tăng các hiện tợng thuỷ triều đỏ ở các vùng biển và những thuỷ vực khác đã và đang gây nhiều thiệt hại về kinh tế, con ngời và môi trờng sinh thái. Từ đó đặt ra nhiệm vụ cấp bách cho các nhà khoa học là tìm hiểu cơ chế bùng phát của chúng nhằm đa ra các giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những ảnh hởng xấu do tảo độc hại gây ra và tiến tới kiểm soát đợc sự bùng phát của chúng. Để góp phần tìm hiểu cơ chế bùng phát của tảo độc hại thì chúng tôi đã thực hiện nội dung nghiên cứu với tiêu đề ảnh hởng một số yếu tố môi trờng tới sự phát triển của một số loài tảo giáp độc hại trong điều kiện phòng thí nghiệm Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP. Hải Phòng 2 II. đối tợng và Phơng pháp nghiên cứu 2.1. Đối tợng nghiên cứu Đối tợng nghiên cứu là các loài tảo tiềm tàng độc hại thuộc các chi Alexandrium, Prorocentrum đã đợc phân lập từ các mẫu thu tại các vùng nuôi trồng thuỷ sản ven biển phía Bắc Việt Nam (Đồ Sơn và Cát Bà) trong năm 2004 và 2005, các loài tảo đợc phân loại tới loài bằng phơng pháp hình thái trên kinh hiển vi, hiển vi điện tử bởi các chuyên gia Nhật Bản và đợc kiểm định lại bằng phơng pháp sinh học phân tử. 2.2. Phơng pháp nghiên cứu 2.2.1. Phơng pháp thu mẫu tảo độc hại (tảo sống) ngoài hiện trờng - Mẫu tảo sống đợc thu bằng lới vớt thực vật phù du với mắt lới 20àm, sau đó bảo quản mẫu trong điều kiện mát (15 - 22 o C bằng đá lạnh) và đa ngay về phòng thí nghiệm để tiếp tục xử lý. - Thu mẫu tảo bám đáy để nuôi bằng cách: ngắt nhẹ các tản rong biển hoặc cành san hô chết cho vào lọ, bổ sung nớc biển lọc, sau đó giữ trong điều kiện mát bằng đá lạnh rồi đa ngay về phòng thí nghiệm. Trớc khi phân lập, để mẫu tảo sống trong buồng nuôi có điều kiện môi trờng tơng đối ổn định về nhiệt độ, cờng độ ánh sáng 2.2.2. Phơng pháp phân lập, làm sạch và giữ giống tảo trong điều kiện phòng thí nghiệm 2.2.2.1. Phơng pháp phân lập và làm sạch - Tiến hành phân lập, nhặt tế bào bằng pipet pasteur đã qua xử lý đèn cồn, phân lập mẫu tảo trên kính hiển vi đảo ngợc. Tiến hành rửa các tế bào đã phân lập đợc qua nớc biển lọc nhiều lần. Sau đó chuyển ngay chúng vào môi trờng nuôi. Tiếp theo, cấy từng tế bào vào từng "giếng" của "vỉ nuôi" và nuôi trong điều kiện môi trờng ổn định tại buồng nuôi. Khi số lợng tế bào tảo trong các giếng nuôi đã tăng lên, chuyển sang các ống nghiệm có thể tích lớn hơn, nếu tảo phân lập cha đợc thuần thì phải tiến hành phân lập lại. Tiếp tục chuyển mẫu nuôi sang các bình tam giác có thể tích lớn hơn (100; 250 ml) khi mật độ tảo trong các ống nghiệm đã phát triển cao. Phân lập tảo đáy: đối với một số loài bơi khá linh động nh Coolia monotis, Prorocentrum cf. mexicanum, Amphidinium carterae có thể tiến hành phân lập nh đối với tảo phù du. Đối với các loài tảo thờng bám chặt vào vật thể đáy nh Prorocentrum lima, P. emarginatum, cách phân lập nh sau: dựa vào tập tính của tảo đáy là thờng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP. Hải Phòng 3 nổi lên bề mặt vào ban đêm, nếu gặp các vật chắn sẽ bám vào, tiến hành đặt các tấm lamen lên trên bề mặt đĩa petri đựng mẫu tảo sống và để qua một đêm. Sau đó cho mỗi mảnh lamen này vào một giếng của vỉ nuôi, hoặc từng ống nghiệm đã có sẵn môi trờng nuôi. Sau khoảng một tuần, tiến hành kiểm tra dới kính hiển vi và chọn ra những giếng thuần giống để làm thí nghiệm. Nếu cha có giống thuần, phải tiến hành lặp lại công việc trên. Kiểm tra sự sinh trởng và phát triển của các mẫu nuôi hàng ngày bằng cách đếm số lợng tế bào dới kính hiển vi đảo ngợc. 2.2.2.2. Phơng pháp giữ giống tảo độc hại trong phòng thí nghiệm Sau khi đã có nguồn giống tảo qua phân lập thì việc khó khăn và rất quan trọng tiếp theo là làm giầu và giữ giống. Việc giữ giống tảo thờng phải kết hợp đồng thời nhiều yếu tố môi trờng nh: - Điều kiện vô trùng: điều quan trọng trớc tiên là tránh bị lây nhiễm các loài khác. Các dụng cụ nuôi (thuỷ tinh, nhựa), môi trờng dinh dỡng, nớc biển đều phải đợc khử trùng. Trong một số trờng hợp để tránh bị kết tủa nớc biển do khử trùng bằng nồi áp suất thì sử dụng phơng pháp khử trùng qua màng lọc. - Chiếu sáng và nhiệt độ: để duy trì và giữ giống tảo, thông thờng ta chọn phơng án dùng ánh sáng yếu và nhiệt độ 15-20 0 C để hạn chế sự sinh trởng và phát triển của chúng. Buồng nuôi phải có trang thiết bị điều khiển và duy trì đợc ánh sáng và nhiệt độ. - Cấy truyền: tần số cấy truyền phụ thuộc vào điều kiện giữ giống và tuỳ thuộc loài tảo. Các dạng tảo đơn bào và tảo dạng sợi không chuyển động có thể đợc cấy truyền với tần số tha hơn so với các loài có roi. Theo dõi giống thờng xuyên để cấy truyền vào thời gian phù hợp. - Môi trờng dinh dỡng: có nhiều loại môi trờng dinh dỡng dùng cho nuôi tảo trong điều kiện phòng thí nghiệm. Nhng để đảm bảo tốt cho sự sinh trởng của tảo thì cần lu ý một số điểm: + Nồng độ mặn (NaCl), thờng phụ thuộc vào nguồn gốc sinh thái của chính cơ thể tảo + Nguồn nitơ, cacbon, phốt phát, và một số ion khác + pH và yếu tố vi lợng khác nh vitamin 2.2.3. Phơng pháp thiết kế thí nghiệm 2.2.3.1. Thí nghiệm ảnh hởng của cờng độ ánh sáng tới sự phát triển của tảo Thí nghiệm đợc tiến hành tại 4 mức cờng độ ánh sáng khác nhau ( 500lux, 1000lux, 2000lux và 3000lux), các yếu tố môi trờng khác đợc duy trì ổn định nh sau: Chu kỳ sáng : tối là 14h : 10h. Nhiệt độ ~24 0 C; S = 24 hoặc tuỳ loài; pH~7,8. Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP. Hải Phòng 4 Tảo đợc nuôi trong môi trờng IMK. Tại mỗi cờng độ ánh sáng, thí nghiệm đợc lặp lại 3 lần với 3 lọ giống nhau về thể tích và mật độ tế bào giống. Hàng ngày kiểm tra sự phát triển của tảo bằng cách đếm số lợng tế bào dới kính hiển vi trên buồng đếm Sedgewick-Rafter thể tích 1ml. 2.2.3.2. Thí nghiệm ảnh hởng của độ mặn tới sự phát triển của tảo Thí nghiệm đợc tiến hành tại 7 độ mặn khác nhau (S1=5; S2=10; S3= 15 ; S4=20; S5=25; S6=30 và S7=35), cờng độ ánh sáng 3000lux và các yếu tố môi trờng khác đợc duy trì ổn định nh sau: Chu kỳ sáng : tối là 14h : 10h. Nhiệt độ ~24 0 C; pH~7,8. Tảo đợc nuôi trong môi trờng IMK. Tại mỗi độ muối, thí nghiệm đợc lặp lại 3 lần với 3 lọ giống nhau về thể tích và mật độ tế bào giống. Mật độ tế bào của tảo đợc kiểm tra 2 ngày một lần bằng cách đếm số lợng tế bào dới kính hiển vi trên buồng đếm Sedgewick-Rafter thể tích 1ml. 2.2.3.3. Thí nghiệm ảnh hởng nhiệt độ tới sự phát triển của tảo Thí nghiệm đợc tiến hành tại 4 mức nhiệt độ khác nhau (35; 30; 25 và 20 0 C), các yếu tố môi trờng khác đợc duy trì ổn định nh sau: Chu kỳ sáng : tối là 14h : 10h; cờng độ ánh sáng là 3000Lux; S = 24 hoặc tuỳ loài; pH~7.8. Tảo đợc nuôi trong môi trờng IMK. Tại mỗi mức nhiệt độ, thí nghiệm đợc lặp lại 3 lần với 3 lọ giống nhau về thể tích và mật độ tế bào giống. Kiểm tra sự phát triển của tảo bằng cách đếm số lợng tế bào tảo hai ngày một lần dới kính hiển vi trên buồng đếm Sedgewick-Rafter thể tích 1ml 2.2.3.4. Thí nghiệm ảnh hởng của muối dinh dỡng tới sự phát triển của tảo Mỗi loại muối dinh dỡng đợc thí nghiệm tại hai nồng độ khác nhau: nồng độ thứ nhất (N1) thấp hơn nồng độ môi trờng chuẩn (IMK) là 2 lần, nồng độ thứ hai (N3) là cao hơn nồng độ môi trờng 2 lần và nồng độ môi trờng chuẩn (N2) là nồng độ đối chứng. Các yếu tố môi trờng khác đợc giữ ổn định: Cờng độ ánh sáng là 3000Lux; Chu kỳ sáng : tối là 14h : 10h. Nhiệt độ ~24 0 C; S = 24 hoặc tuỳ loài; pH~7,8. Tại mỗi nồng độ mặn dinh dỡng, thí nghiệm đợc lặp lại 3 lần với 3 lọ giống nhau về thể tích và mật độ tế bào giống. Trớc khi đặt thí nghiệm thì nồng độ các muối dinh dỡng (NO 3 - ; PO 4 -3 ; NO 2 2- ; H 4 + ; SiO 3 2- ) đợc đo và mẫu nớc đợc lấy ra 3 lần tại các giai đoạn: đầu pha log, cuối pha log và cuối pha cân bằng để kiểm tra nồng độ các muối dinh dỡng (NO 3 - ; PO 4 -3 ). Kiểm tra sự phát triển của tảo bằng cách đếm số lợng tế bào tảo hai ngày một lần dới kính hiển vi trên buồng đếm Sedgewick-Rafter thể tích 1ml. 2.4. Phơng pháp xử lý số liệu - Số liệu đợc cập nhật, tính toán và vẽ đồ thị bằng phần mềm EXCEL Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP. Hải Phòng 5 - Kết quả thí nghiệm đợc kiểm tra độ tin cậy bằng phơng pháp phân tích ANOVA một yếu tố dựa trên chơng trình thống kê trong phần mềm EXCEL (tools-Analysis-ANOVA one way): Giả thiết H 0 là yếu tố thí nghiệm không có ảnh hởng thật sự với sự phát triển của tảo. Nếu kết quả thí nghiệm có F tính toán > F tra bảng thì giả thiết H 0 bị bác bỏ hay yếu tố thí nghiệm có ảnh hởng thật sự tới sự phát triển của loài tảo thí nghiệm với độ tin cậy là 95% ( = 0,05). Nếu kết quả thí nghiệm có F tính toán < F tra bảng thì giả thiết H 0 đợc chấp nhận hay kết quả khác nhau trong các thí nghiệm chỉ là ngẫu nhiên. - Hệ số tơng quan đợc tính bằng phơng pháp phân tích tơng quan hồi quy tuyến tính một lớp trên chơng trình thống kê trong phần mềm EXCEL (tools-Analysis-regression). - Tốc độ phân chia tế bào đợc tính theo công thức: T = (M n+1 M n ) / M n Trong đó: T : tốc độ phân chia tế bào M n : số lợng tế bào ngày đếm n M n+1 : số lợng tế bào ngày đếm n+1 Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP. Hải Phòng 6 III. Kết quả nghiên cứu và thảo luận 3.1. Phân lập, nuôi thành công một số loài tảo và sự phát triển của vi tảo 3.1.1. Phân lập và nuôi thành công một số loài tảo Cùng với quá trình thu mẫu tảo phù du thì chúng tôi đã đồng thời thu mẫu tảo sống tại hai trạm thu mẫu là Đồ Sơn và Cát Bà, sau 12 tháng thu mẫu và phân lập các loài tảo độc hại thì chúng tôi đã phân lập và nuôi thành công 12 chủng tảo độc hại thuộc ngành tảo giáp. Nuôi thu sinh khối để phục vụ cho mục đích phân tích độc tố cũng nh làm nguyên liệu cho việc nghiên cứu trên kính hiển vi điện tử và phân tích sinh học phân tử. Sau khi thực hiện phân loại bằng kính hiển vi huỳnh quang và kiểm tra bằng phơng pháp sinh học phân tử thì trong 12 chủng tảo đã đợc phân lập có 5 loài tảo đã đợc khẳng định, đó là: Alexandrium minutum; Alexandrium affine; Alexandrium tamarense; Prorocentrum cf. mexicanum và Prorocentrum micans. Sau khi phân lập và nuôi thành công 5 loài tảo giáp trên thì chúng tôi đã tiến hành các thí nghiệm về ảnh hởng của các một số yếu tố môi trờng tới sự phát triển của loài, qua thời gian thực hiện đề tài thì chúng tôi đã thu đợc một số kết quả khá khả quan và các kết quả đó sẽ đợc trình bày trong các phần sau của báo cáo. Tuy nhiên do điều kiện thực hiện các thí nghiệm trong khoảng thời gian có hạn và cơ sở vật chất phòng thí nghiệm cha đầy đủ nên một số thí nghiệm cha cho kết quả nh mong muốn. 3.1.2. Sự phát triển của tảo Sự sinh trởng và phát triển của vi tảo đã đợc đề cập bởi nhiều tác giả khác nhau, Đặng Đình Kim (1999) , nhìn chung sự phát triển của vi tảo là một đờng cong gồm 4 giai đoạn hay 4 pha nh hình 1. Theo đờng cong sinh trởng (Hình 1) của vi tảo và các kết quả thí nghiệm ta thấy: - Pha lag: tảo bắt đầu thích nghi với môi trờng nuôi, bắt đầu hấp thu chất dinh dỡng và tiến hành phân cắt tế bào nhng với tốc độ chậm, nếu môi trờng mới thay đổi qúa nhiều so với môi trờng sống cũ của tảo thì thời gian trong giai đoạn này rất dài, thậm chí tảo có thể chết. - Pha log: quần thể tế bào tảo đã thích nghi với môi tr ờng nuôi, mật độ tăng nhanh với tốc độ theo hàm số mũ, kích thớc lớn tế bào lớn, sắc tố nhiều và chuyển động mạnh, có loài thì còn biểu hiện chuỗi tế bào dài, nhìn mắt thờng bên ngoài có xuất hiện nhiều khí trên thành bình, có thể do tảo hấp thụ chất dinh dỡng mạnh, quang hợp xảy ra tốt và phân chia tế bào mạnh, thời gian trong pha này là rất tốt để dùng làm giống cho các thí nghiệm hay chuyển sang môi trờng nuôi mới. [...]... Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra phần làm sáng tỏ sự tác động của muối dinh dỡng PO4-3; NO3- tới sự phát triển của một số loài tảo giáp thì chúng ta đi vào phân tích các kết quả thí nghiệm đã thu đợc sau đây: 3.5.1 ảnh. .. và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra quan hồi quy một lớp, kết quả thu đợc cho thấy: Ftính toán = 13,88 > Ftra bảng = 2,44 và R = 0,99 Vậy, yếu tố nhiệt độ có ảnh hởng thật sự tới. .. > Ftra bảng = 2,09 và R = 0,62 _16 Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra Vậy, yếu tố độ mặn có ảnh hởng thật sự tới sự phát... _27 Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra Từ kết quả trên hình 15 chúng ta thấy, mối tơng quan giữa sự phát triển của tảo và nồng độ muối NO3- là mối tơng... và yếu tố muối dinh dỡng NO3- với sự phát triển của tảo có mối tơng quan tuyến tính rất chặt _25 Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ... tàn dần, nếu có sự phát triển thì cũng rất yếu _ 8 Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra Từ kết quả về tốc độ phân chia... thể nh những loài tảo đã đợc thí nghiệm ta thấy, loài Alexandrium affine _17 Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra có sự phát... nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra không cao nên kích thớc lớn nhất của quần thể đạt đợc vào ngày thứ 20 với mật độ cao nhất là 6022 tb/ml, nh vậy pha log của quần thể... cứu của tác giả Nguyễn Ngọc Lâm khi nghiên cứu sinh thái của loài tảo _23 Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra Alexandrium... thật sự tới sự phát triển của tảo Prorocentrum cf mexicanum hay không thì chúng tôi đã dùng phơng pháp phân tích ANOVA một yếu tố và kiểm tra mối tơng quan bằng phơng pháp tính hệ số _15 Viện Tài nguyên và Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải . đợc tốt. a b Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________. Lục 50 Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________________ . nghiệm Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra ____________________________________________________________________________________