Đang tải... (xem toàn văn)
đề tài: Nghiên cứu một số đặc tính sinh học của vi khuẩn Salmonella phân lập được từ lợn sau cai sữa bị tiêu chảy và chế tạo thử nghiệm vacxin phòng bệnh
Nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Salmonella phân lập từ lợn sau cai sữa bị tiêu chảy chế tạo thử nghiệm vacxin phòng bệnh Đề cương đề tài mã số: CH0668 Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục từ viết tắt vii Danh mục bảng viii Danh mục hình ix ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tình hình nghiên cứu vi khuẩn Salmonella bệnh chúng gây 2.2 Một số đặc điểm vi khuẩn Salmonella 2.3 Bệnh vi khuẩn Salmonella gây lợn 22 2.4 Biện pháp phòng trị bệnh Salmonella gây lợn 27 2.5 Một số hiểu biết vacxin vacxin phịng bệnh Phó thương hàn 28 NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU, ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 3.1 Nội dung nghiên cứu 32 3.2 Đối tượng, địa điểm thời gian nghiên cứu 32 3.3 Nguyên liệu dùng cho nghiên cứu 32 3.4 Phương pháp nghiên cứu 34 Hệ thống Website : Thông tin Liên hệ - Ban biên tập: http://thuvienluanvan.com Hotline trực tiếp: 093.658.3228 (Mr Minh) http://timluanvan.com Điện thọai hỗ trợ: 043.99.11.302 http://choluanvan.com Email: Thuvienluanvan@gmail.com 3.5 Phương pháp sử lý số liệu 42 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 4.1 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella 44 4.1.1 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella từ mẫu bệnh phẩm 44 4.1.2 Kết xác định tỷ lệ phân lập vi khuẩn Salmonella số quan phủ tạng lợn bệnh 46 4.2 Kết giám định số đặc tính ni cấy sinh hóa chủng Salmonella phân lập 51 4.3 Kết xác định serotyp chủng vi khuẩn Salmonella phân lập 55 4.4 Kết kiểm tra mức độ mẫn cảm chủng Salmonella phân lập với số loại kháng sinh 58 4.5 Kết xác định số yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn Salmonella phân lập 61 4.6 Kết xác định độc lực số chủng vi khuẩn Salmonella phân lập chuột nhắt trắng 65 4.7 Kết gây bệnh thực nghiệm lợn chủng Salmonella phân lập 68 4.8 Kết chế tạo thử nghiệm vacxin phòng bệnh Salmonella cho lợn 72 4.8.1 Chế vacxin vơ hoạt có bổ trợ keo phèn phòng bệnh Salmonella cho lợn 72 4.8.2 Kết kiểm tra an toàn hiệu lực vacxin chuột thí nghiệm 75 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 77 5.1 Kết luận 77 5.2 Đề nghị 78 TÀI LIỆU THAM KHẢO 79 Hệ thống Website : Thông tin Liên hệ - Ban biên tập: http://thuvienluanvan.com Hotline trực tiếp: 093.658.3228 (Mr Minh) http://timluanvan.com Điện thọai hỗ trợ: 043.99.11.302 http://choluanvan.com Email: Thuvienluanvan@gmail.com DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ADP Adenosine diphosphate ATP Adenosine triphosphate BHI Brain Heart Infusion BPW Buffered Pepton Water CHO Chinese Hamster Ovary Cell CIRAD Centre de Cooperation Internationale en Recherche Agronomique pour le Developpement DHL Deoxycholate Hydrogen sulfide Lactose DNA Deoxyribonucleic Acid DPF Delayer Permebility Factor DT104 Definitive phage type 104 EDTA Ethylene Diamine Tetra Acetic acid ETEC Enterotoxigenic E coli GDP Guanin diphosphate GTP Guanin triphosphate InvA Invasion A LIM Lysine Indole Motility LPS Lipopolysaccharide LT Heat- Labile Toxin mARN Messenger Acide RiboNucleotide RPF Rapid Permebility Factor ST Heat- stabile Toxin Stn Salmonella toxin TSI Triple- Sugar- Iron PCR Polymerase Chain Reaction RV Rappaports Vassiliadis Hệ thống Website : Thông tin Liên hệ - Ban biên tập: http://thuvienluanvan.com Hotline trực tiếp: 093.658.3228 (Mr Minh) http://timluanvan.com Điện thọai hỗ trợ: 043.99.11.302 http://choluanvan.com Email: Thuvienluanvan@gmail.com DANH MC BNG STT Tên bảng Trang 3.1 Bảng đánh giá mức độ mẫn cảm vi khuẩn với số loại kháng sinh 39 3.2 Trình tự cặp mồi kích cỡ sản phẩm dùng để xác định số yếu tố gây bệnh chủng Salmonella phân lập 40 4.1 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella từ mẫu phân bệnh phẩm 45 4.2 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella số quan phủ tạng lợn bệnh 47 4.3 Kết kiểm tra số đặc tính ni cấy chủng vi khuẩn Salmonella phân lập 51 4.4 Kết giám định số đặc tính sinh hố chủng vi khuẩn Salmonella phân lập 53 4.5 Kết xác định serotyp chủng vi khuẩn Salmonella phân lập 57 4.6 Kết kiểm tra mức độ mẫn cảm với số loại kháng chủngvi khuẩn Salmonella phân lập 60 4.7 Kết kiểm tra số yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn Salmonella phân lập 63 4.8 Kết kiểm tra độc lực số chủng Salmonella phân lập 67 4.9 Các chủng vi khuẩn Salmonella chọn gây bệnh 68 4.10 Kết gây bệnh thực nghiệm Salmonella lợn 35 ngày tuổi 69 4.11 Bệnh tích đại thể lợn gây bệnh thực nghiệm 71 4.12 Kết kiểm tra số tiêu lô vacxin 74 4.13 Kết thử hiệu lực vacxin chuột nhắt trắng 75 Hệ thống Website : Thông tin Liên hệ - Ban biên tập: http://thuvienluanvan.com Hotline trực tiếp: 093.658.3228 (Mr Minh) http://timluanvan.com Điện thọai hỗ trợ: 043.99.11.302 http://choluanvan.com Email: Thuvienluanvan@gmail.com DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 3.1 Quy trình phân lập giám định vi khuẩn Salmonella từ mẫu bệnh phẩm phân 35 3.2 Quy trình sản xuất vacxin vô hoạt bổ trợ keo phèn 43 4.1 Kết phân lập vi khuẩn Sallmonella từ mẫu phân bệnh phẩm 45 4.2 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella số quan phủ tạng lợn bệnh 47 4.1 Ruột lợn bi viêm vi khuẩn Salmonella gây 50 4.2 Lách sưng to lợn mắc bệnh Salmonella gây 50 4.3 Khuẩn lạc Salmonella môi trường CHROM 53 4.4 Khuẩn lạc Salmonella môi trường DHL 54 4.5 Phản ứng lên men đường vi khuẩn Salmonella 54 4.6 Vi khuẩn Salmonella môi trường TSI 55 4.3 Kết xác định serotyp chủng vi khuẩn Salmonella phân lập 57 4.4 Kết kiểm tra số yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn Salmonella phân lập 63 4.7 Kết phản ứng PCR xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn Salmonella 64 4.8 Gây bệnh thực nghiệm cho lợn 72 Hệ thống Website : Thông tin Liên hệ - Ban biên tập: http://thuvienluanvan.com Hotline trực tiếp: 093.658.3228 (Mr Minh) http://timluanvan.com Điện thọai hỗ trợ: 043.99.11.302 http://choluanvan.com Email: Thuvienluanvan@gmail.com ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Tính cấp thiết đề tài Trong năm gần đây, kinh tế nước ta có bước phát triển vượt bậc mặt, đời sống kinh tế xã hội ngày cải thiện Đóng góp phần khơng nhỏ cho thành cơng phải kể đến thành tựu ngành nơng nghiệp, có ngành chăn nuôi thú y mà đặc biệt ngành chăn ni lợn Ngành chăn ni lợn góp phần đáp ứng nhu cầu thực phẩm nước phần dành cho xuất thu ngoại tệ Theo CIRAD (2006)[43], thịt lợn chiếm 77% tổng lượng loại thịt tiêu dùng hàng ngày thị trường Việt Nam Tuy nhiên, thách thức không nhỏ việc phát triển chăn nuôi lợn dịch bệnh thường xuyên xảy đàn lợn lứa tuổi, làm giảm suất, giảm chất lượng giống nhiễm vào sản phẩm thịt lợn gây nguy an toàn vệ sinh thực phẩm Một bệnh thường gặp phải kể đến bệnh tiêu chảy vi khuẩn Salmonella gây lợn sau cai sữa, cịn gọi bệnh Phó thương hàn không nổ thành dịch lớn, với đặc điểm dịch tễ phức tạp, gây nên thiệt hại đáng kể cho người chăn ni Có thể nói sở chăn nuôi dù quy mô lớn hay nhỏ xuất bệnh Khi đời sống nhân dân ngày nâng cao, vấn đề an tồn thực phẩm có lợn thịt lợn bệnh, không bị nhiễm Salmonella yêu cầu cấp thiết Có nhiều tác giả công bố nhiễm Salmonella vào thân thịt lợn trình giết mổ chủ yếu liên quan đến nhiễm trùng Salmonella ruột (Borch cs, 1996[38]; Berends cs, 1997[35]) Do đó, việc giảm tỷ lệ trại bị nhiễm mầm bệnh Salmonella làm an toàn thịt lợn tăng lên Mục tiêu nhà khoa học, nhà sản xuất xây dựng đàn gia súc Salmonella Hệ thống Website : Thông tin Liên hệ - Ban biên tập: http://thuvienluanvan.com Hotline trực tiếp: 093.658.3228 (Mr Minh) http://timluanvan.com Điện thọai hỗ trợ: 043.99.11.302 http://choluanvan.com Email: Thuvienluanvan@gmail.com Nhìn chung vi khuẩn Salmonella bệnh chúng gây lợn nhiều nhà vi sinh vật toàn giới quan tâm Ở Việt Nam có số cơng trình nghiên cứu Salmonella bệnh chúng gây lợn như: Nguyễn Thị Nội cs (1989)[20]; Lê Văn Tạo cs (1993)[26]; Trần Xuân Hạnh (1995) [11]; Cù Hữu Phú cs (2000)[21]; Đỗ Trung Cứ (2004)[6] Theo Bryan (1988)[40]; Nielsen Wegener (1997)[62]; Berends cs 1998[36]; Schwartz (1999)[71]: Các đàn lợn bị nhiễm Salmonella gây thiệt hại kinh tế cho người chăn nuôi mà nguồn tàng trữ mầm bệnh gây hại người Bởi mà biện pháp ngăn chặn có hiệu gia súc cần thiết điều kiện tiên góp phần giảm thiểu dịch bệnh, tăng thu nhập cho người chăn nuôi, chống ô nhiễm môi trường bảo vệ sức khoẻ cộng đồng Vì mà việc phân lập vi khuẩn Salmonella, xác định serotyp đặc tính gây bệnh chúng lợn, nhằm mục đích phát sớm tìm hướng phịng trị bệnh có hiệu việc làm cấp thiết Xuất phát từ thực tiễn nghiên cứu yêu cầu sản xuất, tiến hành nghiên cứu đề tài: "Nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Salmonella phân lập từ lợn sau cai sữa bị tiêu chảy chế tạo thử nghiệm vacxin phòng bệnh." 1.2 Mục tiêu nghiên cứu - Phân lập, xác định hình thái, tính chất ni cấy, đặc tính sinh vật hóa học, serotyp yếu tố gây bệnh vi khuẩn Salmonella phân lập từ lợn sau cai sữa số tỉnh phía Bắc - Chế tạo thử nghiệm vacxin đa giá có chứa số serotyp thường gặp từ trường hợp nhiễm bệnh Salmonella lợn Hệ thống Website : Thông tin Liên hệ - Ban biên tập: http://thuvienluanvan.com Hotline trực tiếp: 093.658.3228 (Mr Minh) http://timluanvan.com Điện thọai hỗ trợ: 043.99.11.302 http://choluanvan.com Email: Thuvienluanvan@gmail.com Đề cương bạn xem Thuvienluanvan.com trích dẫn từ nội dung đầy đủ Quý độc giả có nhu cầu tham khảo tồn nội dung đặt mua tài liệu từ thư viện Vui lòng truy cập đây: http://thuvienluanvan.com/datmua.php (Bấm Ctrl vào link để xem) Xin chân thành cảm ơn quý độc giả quan tâm đến thư viện thời gian vừa qua Thông tin liên hệ: Hotline: 093.658.3228 (Mr.Minh) Điện thoại: 043.9911.302 Email: Thuvienluanvan@gmail.com Hệ thống Website: http://thuvienluanvan.com http://timluanvan.com http://choluanvan.com http://kholuanvan.com Hệ thống Website : Thông tin Liên hệ - Ban biên tập: http://thuvienluanvan.com Hotline trực tiếp: 093.658.3228 (Mr Minh) http://timluanvan.com Điện thọai hỗ trợ: 043.99.11.302 http://choluanvan.com Email: Thuvienluanvan@gmail.com ... cai sữa bị tiêu chảy chế tạo thử nghiệm vacxin phòng bệnh. " 1.2 Mục tiêu nghiên cứu - Phân lập, xác định hình thái, tính chất ni cấy, đặc tính sinh vật hóa học, serotyp yếu tố gây bệnh vi khuẩn. .. trị bệnh có hiệu ln vi? ??c làm cấp thiết Xuất phát từ thực tiễn nghiên cứu yêu cầu sản xuất, tiến hành nghiên cứu đề tài: "Nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Salmonella phân lập từ lợn sau cai. .. định số yếu tố gây bệnh chủng Salmonella phân lập 40 4.1 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella từ mẫu phân bệnh phẩm 45 4.2 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella số quan phủ tạng lợn bệnh