106 BỘ CÔNG THƯƠNG VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC Đề án phát triển ứng dụng công nghệ sinh học trong lĩnh vực công nghệ chế biến đến năm 2010 BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI Tên đề tài/dự án: Nghiên cứu công nghệ sản xuất enzym lignin peroxidase và laccase từ vi sinh vật tái tổ hợp để ứng dụng trong công nghiệp sản xuất giấy Mã số đề tài, dự án: ĐT.07.08/CNSHCB Cơ quan chủ trì đề tài/dự án: Viện Công nghệ sinh học Chủ nhiệm đề tài/dự án: TS. Phạm Thị Bích Hợp Hà Nội , tháng 11 năm 2010 107 LỜI CẢM ƠN Tập thể cán bộ thực hiện Đề tài ĐT.07.08/CNSHCB xin chân thành cảm ơn Bộ Công thương, Văn phòng và Ban chủ nhiệm “Đề án phát triển và ứng dụng công nghệ sinh học trong lĩnh vực công nghiệp chế biến đến năm 2020” đã tin tưởng giao nhiệm vụ thực hiện đề tài. Chúng tôi xin chân thành cảm ơn lãnh đạo Viện Công nghệ sinh học và Phòng thí nghiệm trọng điểm công nghệ gen đã thường xuyên quan tâm, chỉ đạo sâu sát và tạo điều kiện thuận lợi trong suốt quá trình thực hiện đề tài. Chúng tôi xin cảm ơn sự hợp tác chặt chẽ, có trách nhiệm và hiệu quả của các cơ quan, đơn vị phối hợp trong và ngoài Viện Công nghệ sinh học, sự lao động tận tâm và sáng tạo của các cán bộ tham gia thực hiện đề tài. Tập thể cán bộ nghiên cứu 108 TẬP THỂ CÁN BỘ THAM GIA THỰC HIỆN ĐỀ TÀI ĐT.07.08/CNSHCB STT HỌ VÀ TÊN CHỨC VỤ CƠ QUAN 1 TS. Phạm Thị Bích Hợp Chủ nhiệm đề tài Viện CN sinh học 2 TS. Nguyễn Phương Nhuệ Thư ký đề tài Viện CN sinh học 3 TS. Phí Quyết Tiến Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 4 TS. Hồ Tuyên Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 5 TS. Lê Thị Thu Hồng Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 6 ThS. NCS. Nguyễn Văn Hiếu Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 7 ThS.NCS. Phan Thị Hồng Thảo Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 8 ThS. Vũ Thị Hạnh Nguyên Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 9 ThS. Phạm Thanh Huyền Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 10 CN. Nguyễn Thanh Ngọc Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 11 KS. Vũ VănLợi Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 12 KS. Đỗ Tất Thịnh Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 13 ThS. Cao Văn Sơn Nghiên cứu viên Viện CN Giấy-Xenlulô 14 KS. Lương Thị Hồng Nghiên cứu viên Viện CN Giấy-Xenlulô 15 KS. Phạm Đức Thắng Nghiên cứu viên Viện CN Giấy-Xenlulô 16 KS. Hy Tuấn Anh Nghiên cứu viên Viện CN Giấy-Xenlulô 17 KS. Đỗ Thanh Tú Nghiên cứu viên Viện CN Giấy-Xenlulô 18 KS. Dương Ngọc Kiên Nghiên cứu viên Viện CN Giấy-Xenlulô 19 KS. Lã Thị Cúc Nghiên cứu viên Viện CN Giấy-Xenlulô 20 ThS. Nguyễn Thị Hồng Liên Nghiên cứu viên Viện CN sinh học 109 VIỆN KH&CN VIỆT NAM VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC __________________ CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự do - Hạnh phúc Hà Nội, ngày 25 tháng 8 năm 2011 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI I. THÔNG TIN CHUNG 1. Tên đề tài: Nghiên cứu công nghệ sản xuất enzym lignin peroxidase và laccase từ vi sinh vật tái tổ hợp để ứng dụng trong công nghiệp sản xuất giấy. Mã số đề tài: ĐT.07.08/CNSHCB Thuộc: Đề án phát triển và ứng dụng công nghệ sinh học trong lĩnh vực công nghiệp chế biến đến năm 2020. 2. Chủ nhiệm đề tài: Họ và tên: Phạm Thị Bích Hợp Ngày, tháng, năm sinh: 25 - 11 - 1955 Nam/ Nữ: Nữ Học hàm, học vị: Tiến sỹ Chức danh khoa học: Nghiên cứu viên chính Chức vụ Trưởng phòng Điện thoại: Tổ chức: 38362599 Nhà riêng: 37543103 Mobile: 0912981515 Fax: 38363144 E-mail: phamtbh5@yahoo.com; phamhop@ibt.ac.vn; Tên tổ chức đang công tác: Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam Địa chỉ tổ chức: 18 Hoàng Quốc Việt, Q. Cầu Giấy, Hà Nội Địa chỉ nhà riêng: Số 5, ngách 106/2 Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội 3. Tổ chức chủ trì đề tài: Tên tổ chức chủ trì đề tài: Viện Công nghệ sinh học, Viện KH&CN Việt Nam Điện thoại: (04) 38362599 Fax: (04) 38363144 110 E-mail: tnhai@hn.vnn.vn Website: http:/www.ibt.ac.vn Địa chỉ: 18 Hoàng Quốc Việt, Q. Cầu Giấy, Hà Nội Họ và tên thủ trưởng tổ chức: PGS.TS. Trương Nam Hải Số tài khoản: 931.01.064 Ngân hàng: Kho bạc Nhà nước Ba Đình, Hà Nội Tên cơ quan chủ quản đề tài: Bộ Công thương II. TÌNH HÌNH THỰC HIỆN 1. Thời gian thực hiện đề tài: - Theo Hợp đồng đã ký kết: từ 1/ 2008 đến 12/ 2009. - Thực tế thực hiện: từ 10/ 2008 đến 10/ 2010 - Được gia hạn (nếu có): - Lần 1: từ tháng 01 năm 2010 đến hết tháng 9 năm 2010 2. Kinh phí và sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 1.500 tr.đ, trong đó: + Kính phí hỗ trợ từ SNKH: 1.500 tr.đ. + Kinh phí từ các nguồn khác: 0 tr.đ. b) Tình hình cấp và sử dụng kinh phí từ nguồn SNKH: - Tình hình cấp kinh phí từ nguồn SNKH: Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt được Ghi chú (Số đề nghị quyết toán) Thời gian (Tháng, năm) Kinh phí (Tr.đ) Thời gian (Tháng, năm) Kinh phí (Tr.đ) 1 2008 800 20/ 11/2008 308 2 2009 700 24/ 4/2009 492 3 30/ 6/2009 426 4 05/04/2010 274 Cộng 1.500 Cộng 1.500 c) Kết quả sử dụng kinh phí theo các khoản chi: Đối với đề tài: 111 Đơn vị tính: Triệu đồng Số TT Nội dung các khoản chi Theo kế hoạch Thực tế đạt được Tổng SNKH Nguồn khác Tổng SNKH Nguồn khác 1 Trả công lao động (khoa học, phổ thông) 588 588 0 588 588 0 2 Nguyên, vật liệu, năng lượng 683 683 0 683 683 0 3 Thiết bị, máy móc 34 34 0 34 34 0 4 Xây dựng, sửa chữa nhỏ 0 0 0 0 0 0 5 Chi khác 195 195 0 195 195 0 Tổng cộng 1500 1500 0 1500 1500 0 3. Các văn bản hành chính trong quá trình thực hiện đề tài: (Liệt kê các quyết định, văn bản của cơ quan quản lý từ công đoạn xác định nhiệm vụ, xét chọn, phê duyệt kinh phí, hợp đồng, điều chỉnh (thời gian, nội dung, kinh phí thực hiện nếu có); văn bản của tổ chức chủ trì đề tài, dự án (đơn, kiến nghị điều chỉnh nếu có) Số TT Số, thời gian ban hành văn bản Tên văn bản Ghi chú 1 4777/QĐ-BCT, ngày 01/9/2008 Quyết định về việc giao nhiệm vụ năm 2008 Bộ Công thương 2 07/HĐ- ĐT. 07.08/CNSHCB ngày 24/10/2008 Hợp đồng nghiên cứu khoa học và phát triển công nghệ Bộ Công Thương 3 0171/ BCT- KHCN, ngày 07/1/2009 Công văn chuyển kinh phí còn dư năm 2008 tại kho bạc sang năm 2009 Bộ Công thương 4 0936/QĐ-BCT, ngày 23/02/2009 Quyết định về việc giao kinh phí thuộc kế hoạch năm 2009 tiếp tục nhiệm vụ đã giao năm 2008 Bộ Công thương 5 481/ CNSH, ngày 07/ 12/ 200900 Công văn xin điều chỉnh thời gian thực hiện đề tài Viện Công nghệ sinh học 6 6379/QĐ-BCT, ngày 21/ 12/ 2009 Quyết định về việc gia hạn thời gian thực hiện các nhiệm vụ khoa học công nghệ được giao năm 2008 Bộ Công thương 7 4586/QĐ-BCT, ngày 14/9/ 2009 Quyết định phê duyệt kế hoạch đấu thầu mua nguyên liệu, hóa chất và dụng cụ thí nghiệm Bộ Công thương 112 4. Tổ chức phối hợp thực hiện đề tài: Số TT Tên tổ chức đăng ký theo Thuyết minh Tên tổ chức đã tham gia thực hiện Nội dung tham gia chủ yếu Sản phẩm chủ yếu đạt được Ghi chú* 1 Viện Công nghiệp Giấy - Xenluylô Viện Công nghiệp Giấy - Xenluylô Nghiên cứu ứng dụng chế phẩm enzym phân hủy lignin trong tẩy trắng bột giấy và khử màu nước thải sản xuất bột giấy. - 15 bảng số liệu; 05 đồ thị; 05 sơ đồ quy trình. - 02 bài báo trong Tạp chí Hóa học và Tc. Công nghệ sinh học. 5. Cá nhân tham gia thực hiện đề tài, dự án: (Người tham gia thực hiện đề tài thuộc tổ chức chủ trì và cơ quan phối hợp, không quá 10 người kể cả chủ nhiệm) Số TT Tên cá nhân đăng ký theo Thuyết minh Tên cá nhân đã tham gia thực hiện Nội dung tham gia chính Sản phẩm chủ yếu đạt được Ghi chú* 1 TS. Phạm Thị Bích Hợp PTB Hợp, Hồ Tuyên, Nguyễn Văn Hiếu, Phan Thị Hồng Thảo, Vũ Văn Lợi, Đỗ Tất Thịnh Chủ nhiệm đề tài. Nghiên cứu quy trình công nghệ lên men vi sinh vật sản xuất enzym lignin peroxidase và laccase. Tổng hợp số liệu. Viết báo cáo khoa học. Viết báo cáo tổng kết. - 08 bảng số liệu; 16 hình và đồ thị; 02 sơ đồ quy trình. - 03 báo cáo định kỳ. - 05 bài báo khoa học. - Hồ sơ tổng kết nghiệm thu cấp cơ sở và cấp Nhà nước. 2 TS. Nguyễn Phương Nhuệ NP Nhuệ, Phạm Thanh Huyền, PTH Thảo, ĐT Thịnh Thư ký đề tài. Nghiên cứu đặc điểm sinh học và bảo quản một số chủng vi sinh vật tự nhiên sinh enzym laccase được sử dụng - 13 bảng số liệu. - 18 hình và đồ thị. 113 làm nguồn gen. 3 ThS. Phan Thị Hồng Thảo PTH Thảo, NV Hiếu, VV Lợi, PT Huyền, ĐT Thịnh Nghiên cứu điều kiện nuôi cấy và môi trường lên men thích hợp cho các chủng VSV sinh enzym LiP. - 02 bảng số liệu. - 10 hình và đồ thị. - 01 bài báo (Tạp chí CN sinh học). 4 TS. Phí Quyết Tiến PQ Tiến, VV Lợi, PTH Thảo Tạo chủng tái tổ hợp sinh isoenzym lignin peroxidase. - Tạo được 01 chủng tái tổ hợp sinh isoenzym lignin peroxidase. - 01 bài báo (Tạp chí CN sinh học). 5 TS. Lê Thị Thu Hồng LTT Hồng, Nguyễn Thanh Ngọc Tạo chủng tái tổ hợp sinh enzym laccase. - Tạo được 01 chủng tái tổ hợp sinh enzym laccase. - 01 bài báo (Tạp chí CN sinh học). 6 ThS. NCS. Nguyễn Văn Hiếu NV Hiếu, ĐT Thịnh, VV Lợi Nghiên cứu điều kiện nuôi cấy và môi trường lên men thích hợp cho các chủng VSV sinh enzym laccase. - 06 bảng số liệu. - 06 hình và đồ thị. 7 TS. Hồ Tuyên Hồ Tuyên, PTB Hợp, NV Hiếu, VV Lợi Nghiên cứu qui trình công nghệ lên men VSV sinh tổng hợp enzym lignin peroxidase và laccase. - 01 quy trình công nghệ lên men sinh tổng hợp enzym lignin peroxidase. - 01 quy trình công nghệ lên men sinh tổng hợp enzym laccase. 8 ThS. Vũ Thị Hạnh Nguyên VTH Nguyên, PTH Thảo, VV Đánh giá chất lượng enzym lignin - 04 bảng số liệu. - 09 đồ thị. 114 Lợi peroxidase và laccase. 9 ThS. Cao Văn Sơn CV Sơn, Hy Tuấn Anh, Đỗ Thanh Tú, Dương Ngọc Kiên, Lã Thị Cúc Nghiên cứu ứng dụng chế phẩm enzym phân hủy lignin trong tẩy trắng bột giấy. - 07 bảng số liệu. - 01 đồ thị. - 01 bài báo (Tạp chí CN sinh học). 10 KS. Lương Thị Hồng LT Hồng, Phạm Đức Thắng Nghiên cứu ứng dụng chế phẩm enzym phân hủy lignin trong khử màu nước thải bột giấy. - 08 bảng số liệu. - 04 đồ thị. - 02 bài báo (Tc. Hóa học và Tc. CN sinh học). 6. Tình hình hợp tác quốc tế: Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt được Ghi chú* 1 Nội dung: Trao đổi kinh nghiệm về công nghệ phân hủy sinh học lignocellulose. Kinh phí: 53 triệu đồng. Địa điểm: Đại học Công nghệ Suranaree, Nakhon Ratchasima, Thái Lan. Số đoàn: 01 Nội dung: Trao đổi kinh nghiệm về công nghệ phân hủy sinh học lignocellulose. Thời gian: 05 ngày Kinh phí: 53 triệu đồng. Địa điểm: ĐH Công nghệ Suranaree, Nakhon Ratchasima, Thái Lan. Số đoàn: 01 (05 người) 7. Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Số TT Theo kế hoạch (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm ) Thực tế đạt được (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm ) Ghi chú* Không có 8. Tóm tắt các nội dung, công việc chủ yếu: (Nêu tại mục 15 của thuyết minh, không bao gồm: Hội thảo khoa học, điều tra khảo sát trong nước và nước ngoài) Số TT Các nội dung, công việc chủ yếu (Các mốc đánh giá chủ yếu) Thời gian (Bắt đầu, kết thúc - tháng … năm) Người, cơ quan thực hiện Theo kế Thực tế 115 hoạch đạt được 1 Nội dung 1: Nghiên cứu tạo chủng giống vi sinh vật tái tổ hợp bằng công nghệ gen để sản xuất enzym phân hủy lignin. 1/ 2008 đến 6/ 2009 1/2008- 05/2009 Phí Quyết Tiến, Lê Thị Thu Hồng, Nguyễn Phương Nhuệ, Phan Thị Hồng Thảo, Nguyễn Thanh Ngọc, Vũ Văn Lợi 1.1 CV1. Tuyển chọn chủng vi sinh vật tự nhiên có hoạt tính enzym lignin peroxidase làm nguồn gen 5/2009 1.2 CV2. Tuyển chọn chủng vi sinh vật tự nhiên có hoạt tính enzym laccase làm nguồn gen. 5/2009 1.3 CV3. Nhân dòng gen lip mã hóa cho 1-2 isoenzym của lignin peroxidase. 5/2009 1.4 CV4. Tạo chủng vi sinh vật tái tổ hợp mang gen mã hóa cho 1- 2 isoenzym của lignin peroxidase. Sàng lọc chủng tái tổ hợp có khả năng biểu hiện isoenzym lignin peroxidase cao. 06/2010 1.5 CV5. Nhân dòng gen mã hóa cho laccase. 12/2009 1.6 CV 6. Tạo chủng vi sinh vật tái tổ hợp mang gen mã hóa cho laccase. Sàng lọc chủng tái tổ hợp có khả năng biểu hiện enzym laccase cao. 12/2009 2 Nội dung 2: Nghiên cứu xây dựng quy trình công nghệ sản xuất enzym lignin peroxidase 8/2008 đến 12/2009 8/2008 đến 06/2010 Phạm Thị Bích Hợp, Hồ Tuyên, Nguyễn Văn Hiếu, Phan Thị [...]... dụng trong công nghiệp sản xuất giấy với mong muốn góp phần vào sự phát triển của công nghiệp sản xuất enzyme và đặc biệt là phát triển ứng dụng enzyme trong công nghiệp sản xuất bột giấy ở nước ta Các nội dung chính của đề tài là tạo chủng vi sinh vật tái tổ hợp sinh tổng hợp hai enzyme lignin peroxidase và laccase; nghiên cứu xây dựng quy trình lên men sản xuất enzyme và thử nghiệm sử dụng enzyme trong. .. và giấy 5 2.2 Những tiến bộ trong công nghệ tẩy trắng bột giấy 7 3 Hiện trạng công nghiệp giấy ở Vi t Nam 8 3.1 Quy mô sản xuất bột giấy và giấy ở Vi t Nam 8 3.2 Những công nghệ sản xuất giấy đang được áp dụng ở Vi t 9 Nam 4 Xử lý nước thải rửa bột giấy 11 5 Ứng dụng enzym vi sinh vật trong công nghiệp giấy 12 Chương II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 18 1 Nội dung 1 18 1.1 Vật liệu và chủng giống vi sinh vật. .. của công nghệ tạo enzyme tái tổ hợp cho phép cải thiện quá trình sản xuất enzyme nhờ tăng hiệu suất sinh tổng hợp, tăng hiệu suất thu hồi enzyme do giảm hoặc loại bỏ các phản ứng phụ và tăng cường chức năng hoạt động của enzyme, ví dụ cải thiện tính ổn định của hoạt tính v.v Chúng tôi thực hiện đề tài Nghiên cứu công nghệ sản xuất enzyme lignin peroxidase và laccase từ vi sinh vật tái tổ hợp để ứng dụng. .. hiện enzym laccase của 116 chủng tái tổ hợp trong bình tam giác 3.2 CV2 Nghiên cứu môi trường 06/2010 và chế độ cảm ứng cho sự phát triển và sinh enzym laccase của chủng tái tổ hợp 3.3 CV3 Tối ưu hóa môi trường lên men sự phát triển và sinh laccaza của chủng tái tổ hợp 06/2010 06/2010 3.4 CV4 Nghiên cứu động thái lên men sinh tổng hợp enzym laccase tái tổ hợp trên quy mô bình tam giác 3.5 CV5 Nghiên cứu. .. Phương pháp nghiên cứu 18 1.3 Tạo chủng vi sinh vật tái tổ hợp sinh enzym lignin peroxidase 22 1.4 Tạo chủng vi sinh vật tái tổ hợp sinh laccase 25 2 Nội dung 2 và 3 28 2.1 Vật liệu và môi trường nuôi cấy 28 126 2.2 Nghiên cứu khả năng biểu hiện LiP H8 và LAC1 trong bình 29 tam giác 3 Nội dung 4 31 3.1 Vật liệu, hoá chất và thiết bị 31 3.2 Phương pháp nghiên cứu 32 4 Nội Dung 5 43 4.1 Vật liệu 43 4.2... của nhà máy Trong những năm gần đây, ứng dụng công nghệ sinh học trong sản xuất giấy được quan tâm nghiên cứu nhằm xây dựng các quy trình thân thiện với môi trường hơn Các enzyme phân hủy lignin có nguồn gốc từ vi sinh vật như laccase, lignin peroxidase, mangan peroxidase và một số loại khác có thể được tích hợp vào quá trình sản xuất nhằm giảm sử dụng hóa chất và nâng cao chất lượng của bột giấy tẩy... thái lên 06/2010 men sinh tổng hợp enzym laccase tái tổ hợp trong hệ thống lên men quy mô 7,5 lit 3.6 Xây dựng quy trình công nghệ lên men sản xuất enzym laccase tái tổ hợp quy mô 7,5 lit 4 Nội dung 4: Nghiên cứu ứng 7/2010 6/2008 đến 11/2009 6/2009 đến 06/2010 dụng enzym phân hủy lignin (lignin peroxidase, laccase ) trong tẩy trắng bột giấy 4.1 CV1 Nghiên cứu thành phần hóa học và lý học của nguyên... tính 8777 nkat/l 6 Chế phẩm enzym laccase dạng thô (dịch lỏng) Lít 122 100 lít, hoạt tính 400 nkat/l 122 lít, hoạt tính 3600 nkat/l b) Sản phẩm Dạng II: Số TT 1 2 3 Tên sản phẩm Qui trình công nghệ sản xuất chế phẩm enzym lignin peroxidase tái tổ hợp bằng lên men vi sinh vật Qui trình công nghệ sản xuất chế phẩm enzym laccase tái tổ hợp bằng lên men vi sinh vật Kết quả ứng dụng enzym Yêu cầu khoa học cần... dụng trong sản xuất, nghĩa là giảm lượng xả thải hóa chất độc hại ra môi trường - Đã nâng cao được trình độ cán bộ trong nghiên cứu, sản xuất và ứng dụng enzym để tiến tới sản xuất enzym ở quy mô lớn hơn b) Hiệu quả về kinh tế xã hội: Công nghiệp giấy vốn là một trong những ngành sản xuất gây ô nhiễm môi trường rất nghiêm trọng Đây là đề tài đầu tiên tại Vi t Nam nghiên cứu sử dụng enzym phân hủy lignin. .. giấy sau nấu 5.3 CV3 Nghiên cứu ứng dụng 06/2010 enzym phân huỷ lignin kết hợp với biện pháp hóa học để xử lý nước thải rửa bột giấy sau nấu 5.4 CV4 Nghiên cứu ứng dụng enzym phân huỷ lignin kết hợp với biện pháp sinh học kỵ khí để xử lý nước thải rửa bột giấy sau nấu 5.5 CV5 Nghiên cứu sử dụng enzym phân huỷ lignin kết hợp với biện pháp sinh học hiếu khí để xử lý nước thải rửa bột giấy sau nấu 6 Nội . QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI Tên đề tài/dự án: Nghiên cứu công nghệ sản xuất enzym lignin peroxidase và laccase từ vi sinh vật tái tổ hợp để ứng dụng trong công nghiệp sản xuất giấy Mã. THÔNG TIN CHUNG 1. Tên đề tài: Nghiên cứu công nghệ sản xuất enzym lignin peroxidase và laccase từ vi sinh vật tái tổ hợp để ứng dụng trong công nghiệp sản xuất giấy. Mã số đề tài: ĐT.07.08/CNSHCB. khả năng sinh lignin peroxidase và laccase, phù hợp với phạm vi ứng dụng của đề tài. - Đã làm chủ được công nghệ tạo chủng tái tổ hợp sinh tổng hợp enzym cao để có thể đưa vào ứng dụng (quy