Nghiên cứu giá trị một số dấu ấn biệt hoá tế bào máu trong chẩn đoán phân loại và tiên lượng bệnh Lơxêmi cấp người lớn tại Viện Huyết học - Truyền máu

14 985 2
Nghiên cứu giá trị một số dấu ấn biệt hoá tế bào máu trong chẩn đoán phân loại và tiên lượng bệnh Lơxêmi cấp người lớn tại Viện Huyết học - Truyền máu

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Nghiên cứu giá trị một số dấu ấn biệt hoá tế bào máu trong chẩn đoán phân loại và tiên lượng bệnh Lơxêmi cấp người lớn tại Viện Huyết học - Truyền máu

Bộ giáo dục đào tạo Bộ y tế trờng đại học y hà nội Nguyễn Triệu vân Nghiên cứu giá trị số dấu ấn biệt hoá tế bào máu chẩn đoán phân loại tiên lợng bệnh lơxêmi cấp ngời lớn viện huyết học-truyền máu Chuyên ngành Mà số : Huyết học - Truyền máu : 3.01.16 Tóm tắt luận án tiến sĩ y học Hà nội - 2008 Luận án đợc hoàn thành tại: Trờng Đại học Y Hà Nội Danh mục báo liên quan đến luận án đ công bố Nguyễn Triệu Vân, Nguyễn Quang Tùng, Nguyễn Anh Trí, Đỗ Trung Phấn (2004), Giá trị số dấu ấn miễn dÞch (markers) Ng−êi h−íng dÉn khoa häc : PGS TS Nguyễn Anh Trí GS TSKH Đỗ Trung Phấn Phản biện : GS.TSKH Phan Thị Phi Phi Phản biƯn : PGS.TS Ngun Ngäc Minh Ph¶n biƯn : PGS.TS Ngô Thu Thoa chẩn đoán phân loại lơ xê mi cấp dòng lympho Viện Huyết học - Trun m¸u”, Y häc thùc h nh 497, tr 27-29 Đỗ Trung Phấn, Nguyễn Triệu Vân, Nguyễn Quang Tùng, Bạch Quốc Khánh (2004), Nghiên cứu nâng cao chất lợng phân loại leukemia Viện Huyết học - Truyền máu từ năm 2000-2002, Y học thực h nh 497, tr 114-117 Đỗ Trung Phấn, Trần Kiều My, Bạch Quốc Khánh, Trơng Công Duẩn, Nguyễn Triệu Vân, Phạm Quang Vinh cs (2004), Lơ xê mi cấp tiền tuỷ bào, bệnh có khả điều trị đợc, Y học thực h nh 497, tr 214-216 Luận án đà đợc bảo vệ trớc Hội đồng chấm luận án cấp Nhà nớc tổ chức tại: Trờng Đại học Y Hà Nội vào hồi : 14h00 ngày 13 tháng 01 năm 2009 Nguyễn Triệu Vân, Đỗ Trung Phấn, Nguyễn Anh Trí cs (2006), ứng dụng phơng pháp miễn dịch chẩn đoán, phân loại số thể bệnh lơ xª mi cÊp”, Y häc thùc h nh 545, tr 99-102 Nguyễn Triệu Vân (2008),Các dấu ấn trình sản sinh biệt hoá tế bào máu, Y häc ViƯt Nam 344 (2), tr 42-57 Cã thĨ t×m hiểu luận án : - Th viện Quốc gia - Th viện Thông tin Y học Trung ơng Th viện Trờng Đại học Y Hà Nội - Th viƯn ViƯn Hut häc – Trun m¸u TW Đặt vấn đề Đóng góp luận án Về chẩn đoán thể bệnh lơxêmi cấp: Lần có nghiên cứu hệ thống giá trị 16 dấu ấn biệt hoá tế bào máu sử dụng chẩn đoán phân loại lơxêmi cấp Phơng pháp Miễn dịch học (MDH) kết hợp với HTH-HHTB đà góp phần chẩn đoán xác thể bệnh lơxêmi cấp: nhóm bệnh lơxêmi cấp dòng tuỷ, lơxêmi cấp dòng lympho thể bệnh đặc biệt, góp phần nâng cao chất lợng chẩn đoán phân loại bệnh lơxêmi cấp Việt Nam Về phân loại bệnh lơxêmi cấp: Lần có nghiên cứu hệ thống giá trị 16 dấu ấn biệt hoá tế bào máu đà sử dụng phân loại lơxêmi cấp Phơng pháp MDH đà góp phần phân loại chi tiết thành nhóm 27 thể bệnh lơxêmi cấp Đa đợc diện mạo bệnh lơxêmi cấp gặp tỉnh phía bắc Việt Nam Về tiên lợng bệnh: Lần có nghiên cứu ý nghĩa giá trị 16 dấu ấn biệt hoá tế bào máu tiên lợng bệnh lơxêmi cấp Đối với AML, CD14 (+), CD34 (+) cho biết dấu hiệu tiên lợng xấu điều trị, làm cho tỷ lệ lui bệnh giảm, khác biệt lui bệnh không lui bệnh có ý nghĩa thống kê với p 30% số lợng tế bào có nhân Việc phân loại lơxêmi cấp theo dòng tuỷ hay dòng lympho dựa đặc điểm hình thái học, với bổ sung hoá học tế bào Các tiến hoá sinh đà cho thấy dòng tế bào có đặc điểm chuyển hoá khác Căn vào đặc điểm khác biệt phản ứng hoá sinh này, ngời ta tiến hành kỹ thuật nhuộm hoá học tế bào để phân loại bệnh 1.5 Phơng pháp MDH ứng dụng chẩn đoán v phân loại lơxêmi cấp Từ đầu năm 70, số nhà nghiên cứu bắt đầu áp dụng miễn dịch học phân loại ALL Bằng kỹ thuật tạo hoa hồng E EAC, Borella S L thấy khoảng 24% trờng hợp ALL tạo hoa hồng với hồng cầu cừu 1% có globulin miễn dịch màng 75% trờng hợp lại đợc xếp vào nhóm ALL không T- không B cha có kháng thể đặc hiệu Greaves (1975) phát kháng nguyên CALLA (kháng nguyên phổ biến ALL) Foon K.A (1986) đánh giá trình phân loại MDH lơxêmi cấp cho thấy, ALL có dới nhóm: dòng T (15-20%), dòng B trởng thành (5%), thể CALLA(+) 70% thể tiền B (có IgM bào tơng) chiếm phần lại Đối với AML, vào thời điểm này, cha tìm dấu ấn đặc trng cho dòng tế bào ác tính nh giai đoạn biệt hoá tế bào, cha có phù hợp phân loại miễn dịch học với phân loại HTH-HHTB đơn dựa vào men MPO Những năm 70, kỹ thuật sản xuất kháng thể đơn dòng phát triển mạnh, nhờ đà phát dấu ấn biệt hoá đặc hiệu với dòng tế bào giai đoạn biệt hoá Gần đây, nhiều trung tâm huyết học giới đà áp dụng MDH phân loại lơxêmi cấp thu đợc nhiều kết Với AML, số BN âm tính với nhuộm sudan đen MPO lại dơng tính với CD33 MPO bào tơng Thể M7 đợc xác định sử dụng phơng pháp MDH với CD41 và/hoặc CD61 CD14 đặc hiệu cho thể bệnh dòng mono có giá trị việc xác định thể M4, M5 Với ALL, giá trị phân loại miễn dịch học đà đợc thừa nhận rộng rÃi ALL đà đợc phân loại theo dòng tế bào tổn thơng Ngoài kháng thể đặc hiệu với dấu ấn màng, số kháng thể kháng lại thành phần bào tơng nh men MPO dòng hạt, men TdT (men chuyển nhóm deoxyribonucleotidyl tận) dòng lympho, CD globulin miễn dịch bào tơng , yếu tố góp phần xác định giai đoạn biệt hoá, tình trạng lui bệnh, mối liên quan với lâm sàng, xác định yếu tố tiên lợng bệnh tồn d tối thiểu Đóng góp quan trọng khác MDH phân loại lơxêmi cấp phát thể bệnh lai Có thể có dấu ấn dòng tuỷ dấu ấn dòng lympho tế bào blast, gọi lơxêmi lai hai kiểu hình (biphenotype) Có thể có hai quần thể tế bào blast tồn đồng thời BN, gọi lơxêmi lai hai dòng (bilineage) Hiện tợng lai dòng lympho, gọi lai dòng (intralineage), lai dòng tuỷ dòng lympho, gọi lai liên dòng (inter-lineage) Thậm chí, có BN võa biĨu hiƯn lai hai kiĨu h×nh, võa biĨu hiƯn lai hai dòng Cũng phơng pháp MDH với dấu ấn đặc hiệu đà phát lơxêmi cấp dòng NK Nhiều trờng hợp trớc đợc chẩn đoán AML-M3 đặc điểm hình thái học giống tiền tuỷ bào nhiều hạt CD33(+), nhng điều trị đáp ứng với chất cảm ứng biệt hoá (nh ATRA) không phát biến loạn di truyền đặc hiệu t(15 ;17) Phần lớn trờng hợp thực lơxêmi cấp lai tuỷ-NK (CD33+/CD56+) lơxêmi cấp dòng NK thực (CD33/CD56+) Nh vậy, Miễn dịch học góp phần điều chỉnh phơng thức điều trị hợp lý hiệu Chơng 1.6 Phơng pháp Di truyền tế b o chẩn đoán v phân loại lơxêmi cấp Tổn thơng di truyền lơxêmi cấp đa dạng Từ bất thờng NST nh dới lỡng bội, lỡng bội, đến biến đổi cấu trúc NST nh chuyển đoạn (t), đảo đoạn (inv), đoạn (del) biến đổi cấu trúc phân tử, không phát đợc dới kính hiển vi nh đột biến điểm, xếp lại vài phân tử nucleotide Vì vậy, kỹ thuật phân tích di truyền sinh học phân tử đà đợc ứng dụng rộng rÃi nghiên cứu biến loạn nh nhuộm băng NST, lai ADN chỗ có gắn huỳnh quang (FISH), PCR, đa hình thái chiều dài đoạn ADN nhờ men hạn chế (RFLP) Tuy nhiên, cần thừa nhận nhiỊu biÕn lo¹n di trun chØ mang ý nghÜa th−êng gặp có giá trị tham khảo, không hoàn toàn đặc hiệu riêng cho thể bệnh 1.7 Điều trị lơxêmi cấp Lơxêmi cấp ung th hệ thống; việc điều trị chủ yếu sử dụng hoá trị liệu, không sử dụng tia xạ, phẫu thuật Kết điều trị lơxêmi cấp đà đợc cải thiện nhiều nhờ tiến hoá trị liƯu chèng ung th−, tiÕn bé cđa ghÐp tÕ bµo gốc tạo máu hớng điều trị cảm ứng biệt hoá, điều trị nhắm đích Tuy nhiên mong muốn kết điều trị phía trớc ĐốI TƯợNG - PHƯƠNG PHáP NGHIÊN CứU 2.1 Đối tợng nghiên cứu 1118 B N lơxêm i cấp từ 08/1996 đến 06/2007 P h ân loại H TH H H TB & M D H D ßng tủ : 656 B N D ßng lym D ßng kh¸c : 260 B N : 202 B N 142 B N ph©n tÝch bÊt th−ê ng N S T D ßn g tu û : 101 B N D ßn g lym p ho : 24 B N D ßn g kh¸c : 17 B N 110 B N đ ợc điều trị đ ánh giá tiên lợng D ß ng tu û : 63 B N D ß ng lym p h o : 24 B N D ò ng kh ác : 23 B N Sơ đồ 2.1 Sơ đồ mô tả đối tợng nghiên cứu 2.2 Phơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Chọn mẫu nghiên cứu: Chọn mẫu ngẫu nhiên, lần lợt 2.2.2 Thiết kế mô hình nghiên cứu Bệnh nhân v o v iệ n C h ẩ n đ o n x c đ ịn h L x ê m i c Ê p b » n g P P H ìn h th i h ọ c C h ẩ n đ o n , p h â n lo i b ằ n g P P H T H -H H T B & M iƠ n d Þc h h ä c D ß n g tu û D ß n g ly m p h o P h © n tÝc h b Ê t th − ê n g n h iễ m s ắ c th ể Đ n h g iá liê n q u a n v í i d Ê u Ê n m iÔ n d ịc h Dòng khác Đ iề u tr ị & th e o d â i k Õ t q u ả Đ n h g iá y ế u tố tiê n l ợ n g Sơ đồ 2.2 Mô hình nghiên cứu giá trị số dÊu Ên biƯt ho¸ tÕ b o m¸u 2.3 Thu thËp v xư lý sè liƯu Sè liƯu nhóm bệnh nhân nghiên cứu đợc thu thập xử lý theo phần mền thống kê Y sinh học Nhập số liệu phần mềm EPI-DATA phân tích chơng trình STATA 9.2 ứng dụng thuật toán thống kê X2 để so sánh khác biệt kết điều trị nhóm bệnh nhân lui bệnh nhóm bệnh nhân không lui bệnh với xuất dấu ấn biệt hoá tế bào máu (CD+) Chơng kết nghiên cứu 3.1 Một số đặc điểm nhóm nghiên cứu 3.1.1 Phân bố theo tuổi nhóm bệnh nhân nghiên cứu Bảng 3.1 Phân bố theo tuổi Tuổi Nam Nữ 16-29 30-45 46-60 Trên 60 Tổng cộng 213 175 140 95 623 168 141 95 91 495 Céng Sè l−ỵng 381 316 235 186 1118 Tû lƯ % 34,08 28,26 21,02 16,64 100 Nhận xét: Phần lớn bệnh nhân nằm nhóm tuổi trẻ tuổi lao động Lứa ti 16-29 chiÕm cao nhÊt víi 34,08% 3.1.2 Ph©n bè theo giới nhóm bệnh nhân nghiên cứu 3.1.3 Đặc điểm nhóm bệnh nhân theo nghề nghiệp Bảng 3.2 Phân bố bệnh nhân theo nghề nghiệp Nghề L m ruộng Cán Công nhân Về hu Học sinh Khác Tổng cộng TT TØnh/th nh H Néi C¸c tØnh khác (33 tỉnh) Tổng cộng Lơxêmi cấp Nữ Theo dõi lơxêmi cấp Theo dõi rối loạn sinh tủy Các bệnh khác Tỷ lệ Nam/Nữ = 1,25/1 Biểu đồ 3.1 : Tû lƯ ph©n bè theo giíi NhËn xÐt: Tû lƯ bệnh nhân Nam mắc bệnh nhiều Nữ 1,25 lần n 426 692 1118 % 38,1 61,9 100 NhËn xÐt: Các bệnh nhân nghiên cứu 34 tỉnh khác nhau, đông Hà Nội chiếm 38,1% Các tỉnh lại chiếm 61,9% 3.2 Giá trị phơng pháp với chẩn đoán thể bệnh lơxêmi cấp 3.2.1 Chẩn đoán lơxêmi cấp qua thăm khám lâm s ng Bảng 3.4 Kết chẩn đoán qua khám lâm s ng Nam 56% % 39,44 15,74 9,30 13,15 19,68 2,69 100 NhËn xét: Các bệnh nhân tập trung chủ yếu nghề nông với 39,44% Một đối tợng nghề khác đáng quan tâm học sinh-sinh viên chiếm tỷ lệ đáng kể 19,68% 3.1.4 Phân bố bệnh nhân theo địa d Bảng 3.3 Phân bố bệnh nhân theo tỉnh Chẩn đoán 44% n 441 176 104 147 220 30 1118 Tæng céng Nam 146 23,43% 414 66,45% 14 2,25% 49 7,87% 623 100% N÷ 97 19.60% 318 64,24% 21 4,24% 59 11,92 495 100% Céng 243 21,74% 732 65,47% 35 3,13% 108 9,66% 1118 100% Nhận xét: Nếu khám lâm sàng, có 21,74% bệnh nhân đợc chẩn đoán lơxêmi cấp (sau đối chiếu xét nghiệm huyết học) 9 10 3.2.2 Chẩn đoán thể lơxêmi cấp phơng pháp HTH-HHTB Bảng Kết chẩn đoán thể lơxêmi cấp theo HTH-HHTB Bảng 3.8 Kết xác chẩn phơng pháp MDH Dòng/Thể bệnh Dòng tủy Dòng lympho Các thể bệnh khác cha rõ Tổng cộng n 728 298 92 1118 % 65,12 26,65 8,23 100 NhËn xét: Bằng phơng pháp HTH-HHTB, kết cho thấy tỷ lệ lơxêmi cấp dòng tủy chiếm 65,12% dòng lympho chiếm 26,65% Tỷ lệ thể bệnh khác cha rõ thể chiếm 8,23% 3.2.3 Chẩn đoán thể bệnh lơxêmi cấp phơng pháp MDH Bảng 3.6 Kết chẩn đoán thể bệnh lơxêmi cấp theo MDH n Thể bệnh Dòng tủy Dòng lympho Các thể bệnh khác (Các thể ®Ỉc biƯt) Tỉng céng % 656 260 202 1118 58,68 23,26 18,07 100 Nhận xét: Phơng pháp MDH đà chẩn đoán xác định lơxêmi cấp dòng tủy chiếm 58,68%, dòng lympho chiếm 23,26% 18,07 % thể bệnh khác lơxêmi cấp 3.2.4 So sánh kết chẩn đoán thể bệnh lơxêmi cấp phơng pháp MDH v phơng pháp HTH-HHTB Bảng 3.7 Sự khác chẩn đoán HTH-HHTB v MDH Chẩn đoán Miễn dịch học Dòng tuỷ Dòng lympho Các thể bệnh khác Tổng cộng Chẩn đoán HTH-HHTB Dòng tuỷ Dòng Ly Các thể bệnh kh¸c 591 (81,18%) 32 (4,40%) 105 (14,42%) 728 (100%) 29 (9,73%) 199 (66,78%) 70 (23,49%) 298 (100%) 36 (39,13%) 29 (31,52%) 27 (29,35%) 92 (100%) Céng 656 260 202 1118 Pearson x2 (4) = 563,9 p < 0,001 NhËn xÐt: Sự khác biệt kết chẩn đoán lơxêmi cấp HTH-HHTB MDH có ý nghĩa thống kê với p 0,05) 15 16 3.5 Đặc điểm dấu ấn biệt hoá tế b o máu liên quan đến tiên lợng bệnh 3.5.1 Số bệnh nhân đợc theo dõi điều trị 3.5.3.2 Dấu ấn CD13 với kết điều trị lơxêmi cấp dòng tuỷ Bảng 3.17 Dấu ấn CD13 với kết điều trị dòng tuỷ CD13 20.90% Âm tính Dơng tính 21.82% 57.28% Dòng tủy Dòng lympho Các thể bệnh khác n = 63 BiĨu ®å 3.4: n=24 n = 23 Σ = 110 Các dòng/ thể lơxêmi cấp đợc điều trị Nhận xét: Có 110 BN đợc điều trị gồm dòng tuỷ 57,28%, dòng lympho 21,82% thể bệnh khác 20,90% 3.5.2 Kết điều trị lơxêmi cấp chung 20.91% 8.18% 70.91% Tỉng céng NỈng - chÕt n = 78 n=23 n=9 = 110 Biểu đồ 3.5: Kết điều trị lơxêmi cấp chung Nhận xét: Có 70,91% BN lui bệnh Có 20,91% BN không lui bệnh 8,18% BN nặng chết 3.5.3 Dấu ấn biệt hoá tế b o máu v điều trị lơxêmi cấp dòng tuỷ 3.5.3.1 Kết điều trị lơxêmi cấp dòng tuỷ 15.87% 7.94% 76.19% CD14 Tỉng céng NỈng - chÕt n = 48 n=10 n=5 = 63 Biểu đồ 3.6: Kết điều trị lơxêmi cấp dòng tuỷ 54 63 Lui bệnh 39 81,25% 18,75% 48 100% Kh«ng LB 50,0% 50,0% 10 100% NỈng-chÕt 100,0% 0,0% 100% Céng 49 14 63 NhËn xÐt: Sù kh¸c biƯt xt hiƯn cđa CD14+ sè BN lui bƯnh vµ không lui bệnh có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) 3.5.3.4 Dấu ấn CD34 với kết điều trị lơxêmi cấp dòng tuỷ Bảng 3.19 Dấu ấn CD34 v kết điều trị dòng tuỷ CD34 Âm tính Không lui bƯnh Céng B¶ng 3.18 DÊu Ên CD14 v kết điều trị dòng tuỷ Dơng tính Lui bệnh NỈng- chÕt 0,00% 100,0% 100% 3.5.3.3 DÊu ấn CD14 với kết điều trị lơxêmi cấp dòng tuỷ Dơng tính Không lui bệnh Không LB 10,00% 90,00% 10 100% NhËn xÐt: Sù kh¸c biƯt xt hiƯn cđa CD13+ sè BN lui bƯnh vµ không lui bệnh ý nghĩa thống kê (p > 0,05) ¢m tÝnh Lui bƯnh Lui bƯnh 16,67% 40 83,33% 48 100% Tỉng céng Lui bƯnh 26 54,17% 22 45,83% 48 100% Kh«ng LB 30,0% 70,0% 10 100% NỈng-chÕt 100,0% 0,0% 100% Céng 34 29 63 NhËn xÐt: Sù kh¸c biƯt xt CD34+ số BN lui bệnh không lui bƯnh cã ý nghÜa thèng kª ( p < 0,05) 17 18 3.5.4 DÊu Ên biƯt ho¸ tÕ b o máu v điều trị lơxêmi cấp dòng lympho 8.33% Bàn luận 20.83% 70.83% Lui bệnh Không lui bệnh Nặng - chÕt n = 17 n=5 n=2 Σ = 24 Biểu đồ 3.7 : Kết điều trị dòng lympho Nhận xét: Tỷ lệ lui bệnh lơxêmi cấp dòng lympho 70,83% Bảng 3.20: Chi tiết kết thể bệnh điều trị dòng lympho Kết Lui bệnh Không lui bệnh Nặng-chết Tổng cộng Dòng B lympho 13 (81,25%) (18,75%) (0%) 16 Dßng T lympho (50%) (25%) (25%) Céng 17 24 NhËn xÐt: Tû lƯ lui bƯnh dßng B tèt dòng T (p

Ngày đăng: 08/04/2014, 13:27

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan