Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất và đánh giá một số tác dụng dược lý thuốc tiêm đông khô methylprednisolon natri succinat
1 Bộ giáo dục và đào tạo Bộ quốc phòng Học viện quân y Lê Công Nhờng NGHIêN CứU hoàn thiện quy trình Sản xuất Và đánH GIá một số TáC DụNG dợc lý THUốC TIêM đôNG KHô METHYLPREDNISOLON NATRI SUCCINAT Chuyên ngành: Bào chế Mã số: 62.73.01.05 Tóm tắt Luận án tiến sĩ dợc học Hà Nội - 2008 2 Công trình đợc hoàn thành tại học viện quân y Ngời hớng dẫn khoa học: 1- PGS.TS. trịnh văn lẩu 2- PGS.TS. Nguyễn Văn Long Phản biện 1: GS.TS. Trịnh Văn Quỳ Phản biện 2: PGS.TS. Trần Thế Tăng Phản biện 3: PGS.TS. Nguyễn Trọng Thông Luận án đợc bảo vệ trớc Hội đồng chấm luận án tiến sĩ cấp Nhà nớc, họp tại Học viện Quân y vào hồi 8 giờ 30 ngày 15 tháng 8 năm 2008 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Th viện Quốc gia - Th viện Học viện Quân y 3 Danh mục các công trình của tác giả đ công bố có liên quan đến luận án 1- Lê CôNG NHờNG - NGUYễN VăN LONG - NGUYễN ĐăNG HòA - Lê MY UYêN (2006) Nghiên cứu bào chế thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natri succinat , Tạp chí Dợc học, 11, tr. 24 - 27. 2- Lê Công Nhờng- Nguyễn Văn Long (2006) Xây dựng công thức thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natri succinat , Tạp chí Y Dợc học quân sự, số đặc san, tr. 18-24. 3- Lê Công Nhờng (2007) Nghiên cứu áp dụng phần mềm thống kê Pharmasoft TD để thẩm định quy trình sản xuất thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natri succinat, Tạp chí Kiểm nghiệm thuốc, 4, tr. 17-22. 4- Lê Công Nhờng - Nguyễn Văn Long- Đặng Văn Giáp (2008) Tối u hóa quy trình sản xuất thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natrisuccinat, Tạp chí Y Dợc học quân sự , 1, tr. 5-10. 4 Ký HIệU viết tắt BC : Bạch cầu C m : Chỉ báo hiệu năng máy móc C Pm : Chỉ báo tình trạng lệch tâm CV : Coefficient of variation (Hệ số biến thiên) HC : Hồng cầu HST : Huyết sắc tố KQ : Kết quả LD 50 : Liều chết 50% động vật thí nghiệm MKLDSK : Mất khối lợng do sấy khô MPN : Methylprednisolon natri succinat QTSX : Quy trình sản xuất RSD : Relative standard deviation (Độ lệch chuẩn tơng đối) SGOT : Serum glutamo-oxalo transaminase SGPT : Serum glutamo-pyruvic transaminase Soli- medon : Thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natri succinat do Bidiphar sản xuất TC : Tiểu cầu TLCT : Trọng lợng cơ thể 5 Đặt vấn đề Đông khô là quá trình làm khô các thuốc và chế phẩm sinh học ở nhiệt độ thấp, dới các điều kiện thích hợp, để loại trừ dung môi bằng cách thăng hoa, nghĩa là thay đổi trạng thái từ thể rắn sang thể hơi, không qua thể lỏng. Kỹ thuật đông khô thờng đợc áp dụng để sản xuất thuốc tiêm, thuốc dùng cho nhãn khoa, các thuốc sinh phẩm. ở Việt Nam, cho tới nay hầu nh cha có công trình nào nghiên cứu triển khai công nghệ đông khô trong sản xuất thuốc quy mô lớn, trừ một vài công trình ứng dụng công nghệ đông khô trong sản xuất vaccin nhờ việc nhập công nghệ của nớc ngoài do các dự án thuộc lĩnh vực y tế dự phòng tài trợ. Hiện nay trờng Đại học dợc Hà Nội đã có những nghiên cứu kỹ thuật đông khô ở qui mô phòng thí nghiệm. Trong khi đó, nhu cầu về các chế phẩm thuốc đông khô nói chung, thuốc tiêm đông khô nói riêng, ngày một tăng đòi hỏi phải sản xuất ở quy mô công nghiệp. Thuốc tiêm MPN là một thuốc chống viêm steroid đợc sử dụng khá rộng rãi trên lâm sàng, đặc biệt trong các ca bệnh cấp cứu. MPN rất dễ bị thủy phân, không bền ở dạng dung dịch nên thuốc đợc bào chế dới dạng thuốc tiêm đông khô và chỉ đợc pha lại thành dung dịch trớc khi tiêm. Hiện trong nớc cha sản xuất đợc thuốc tiêm đông khô này nên toàn bộ nhu cầu về thuốc dùng trong điều trị đều phải nhập khẩu từ nớc ngoài. Nhằm đáp ứng nhu cầu điều trị trong nớc thay thế dần thuốc nhập ngoại cho chế phẩm chứa hoạt chất này, tôi thực hiện đề tài luận án: Nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất và đánh giá một số tác dụng dợc lý thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natri succinat. 6 Mục tiêu của luận án: 1 - Triển khai đợc QTSX ở qui mô công nghiệp 2 - Thẩm định QTSX trên 3 lô công nghiệp. 3 - Xác định đợc tuổi thọ của chế phẩm nghiên cứu, nâng cao và theo dõi tuổi thọ của thuốc từ 24 lên 36 tháng. Tiêu chuẩn chất lợng chế phẩm đạt theo tiêu chuẩn USP 30. 4 - So sánh chất lợng của chế phẩm nghiên cứu với chế phẩm đối chiếu trên cơ sở đánh giá một số tác dụng dợc lý của thuốc trên động vật thí nghiệm. Nội dung nghiên cứu của luận án: - Nghiên cứu phát triển công thức và QTSX thuốc tiêm đông khô MPN 40mg/lọ với quy mô 10.000 lọ/mẻ bằng phần mềm tối u hóa. - Nghiên cứu thẩm định QTSX thuốc tiêm đông khô MPN theo phơng pháp truyền thống: đánh giá trên 3 mẻ, cỡ 10.000 lọ/mẻ, dựa vào chỉ tiêu chất lợng đã xây dựng, bao gồm hàm ẩm (MKLDSK), hàm lợng dợc chất và tạp chất liên quan, độ vô khuẩn. Ngoài ra còn kết hợp tối u hóa và thẩm định QTSX. - Nâng cấp tiêu chuẩn chất lợng và theo dõi độ ổn định của chế phẩm ở điều kiện phòng thí nghiệm (nhiệt độ 30 2 0 C, RH = 75 5%), điều kiện thực theo mùa và lão hóa cấp tốc (nhiệt độ 40 2 0 C, RH = 75 5%) để xác định hạn dùng của chế phẩm. - Đánh giá độ an toàn của chế phẩm, tác dụng chống viêm, giảm đau của chế phẩm Soli - medon trên động vật thí nghiệm, so sánh với biệt dợc Solu - Medrol. Những đóng góp mới của luận án: - Xây dựng đợc quy trình sản xuất thuốc tiêm đông khô MPN ở quy mô công nghiệp thông qua tối u hóa, làm cơ sở cho việc áp 7 dụng triển khai các sản phẩm đông khô ở qui mô công nghiệp từ phòng thí nghiệm. - Xây dựng đợc phơng pháp thẩm định kết hợp với tối u hóa trong lĩnh vực thuốc tiêm đông khô giúp giảm chi phí và thuận tiện cho các quy trình đăng ký lần đầu. - Xây dựng đợc hệ thống tài liệu trong thẩm định thuốc tiêm đông khô là loại thuốc mới ở Việt Nam. - Xây dựng thẩm định mô phỏng để ứng dụng cho các thuốc tiêm không tiệt trùng cuối. - Đánh giá đợc độ an toàn và tác dụng của Soli-medon trên súc vật và chứng minh là tơng đơng với thuốc ngoại nhập. Cấu trúc của luận án Gồm 144 trang, gồm 54 bảng, 4 sơ đồ, 31 hình, 110 tài liệu tham khảo bằng tiếng Việt, tiếng Anh. Bố cục nh sau: Đặt vấn đề 2 trang; Phần nội dung gồm: Tổng quan tài liệu 41 trang, nguyên liệu, thiết bị và phơng pháp nghiên cứu 21 trang, kết quả nghiên cứu 58 trang, Bàn luận 19 trang, Kết luận và kiến nghị 3 trang. Danh mục các bài báo công bố có liên quan đến luận án 1 trang, tài liệu tham khảo 12 trang; Ngoài ra, luận án còn có 11 phụ lục với 42 trang. chơng 1. tổng quan Phần tổng quan trình bày những nét cơ bản về: Kỹ thuật đông khô và thẩm định quy trình sản xuất; tìm hiểu về MPN; tình hình nghiên cứu sản xuất thuốc tiêm đông khô MPN. Qua các tài liệu tổng quan cho thấy kỹ thuật đông khô là một phơng pháp đợc áp dụng với các dợc chất dễ bị thủy phân, dợc chất ít tan, dợc chất nhạy cảm với nhiệt. MPN là một chất dễ bị thủy phân nên cần bào chế dới dạng 8 thuốc tiêm đông khô. Phần tổng quan cũng đề cập đến cơ chế của sự thủy phân và biện pháp khắc phục. Phần thẩm định đã đề cập đến các khái niệm, loại hình và nội dung tiến hành thẩm định QTSX. Đặc biệt đề cập đến thẩm định mô phỏng. Tổng quan cũng đề cập đến tối u hóa QTSX, tìm hiểu MPN về cấu trúc hóa học, vật lý, tác dụng dợc lý cũng nh các nghiên cứu về chế phẩm MPN Chơng 2. đối tợng v phơng pháp nghiên cứu 2.1. Nguyên liệu, thiết bị 2.1.1 Nguyên liệu: MPN là của hãng Biofer - ý, các tá dợc, chất đệm, hóa chất kiểm nghiệm đều là loại dợc dụng hoặc tinh khiết phân tích đạt tiêu chuẩn quy định. 2.1.2. Thiết bị: Sử dụng máy đông khô GZL-6 và các thiết bị sản xuất khác đều đang đợc sử dụng tại công ty. Các thiết bị kiểm nghiệm và đánh giá tác dụng của công ty và trung tâm nghiên cứu đều hiện đại và tin cậy. 2.1.3. Phần mềm: Phần mềm Design - Expert v6.06, Stat-Ease, inc. 2002, phần mềm FormRules v3.22 (2006); Phần mềm INForm v3.5 (2006), phần mềm thẩm định Pharmasoft TD. Đây là những phần mềm mới đợc ứng dụng nhiều trong sản xuất dợc phẩm. 2.1.4. Động vật thử nghiệm: 30 thỏ trắng; 162 chuột cống trắng; 216 chuột nhắt trắng 2.2. Phơng pháp nghiên cứu 2.2.1. Tơng quan giữa quy trình thí nghiệm và qui mô sản xuất công nghiệp: Có sự khác biệt thông số máy của qui mô thí nghiệm và công nghiệp cũng nh vật t, hóa chất nên cần phải khảo sát lại. 9 2.2.2. Thiết kế mô hình thực nghiệm bằng phần mềm Design- Expert v6.06 Đã thiết kế thí nghiệm theo mô hình Taguchi OA L16 (4^5) gồm 16 thí nghiệm với 5 biến số: x 1 = hỗn hợp tá dợc độn (g); x 2 = lợng Natri dihydrophosphat dạng khan (g); x 3 = nhiệt độ đông lạnh; x 4 = thời gian sấy; x 5 = áp suất buồng. Mỗi biến khảo sát 4 mức. 2.2.3. Phơng pháp phân tích nhân quả bằng phần mềm FormRules Dữ liệu thực nghiệm để nghiên cứu liên quan nhân quả gồm có 5 biến độc lập (tỷ lệ hỗn hợp tá dợc độn, lợng Natri dihydrophosphat, nhiệt độ đông lạnh, thời gian sấy và áp suất buồng) và 6 biến phụ thuộc (hình thức cảm quan, độ pH, độ ẩm, hàm lợng hoạt chất, số lợng pic tạp chất và hàm lợng tạp chất). 2.2.4. Phơng pháp tối u hóa công thức/quy trình bằng phần mềm INForm v3.5 Tối u hóa bằng phần mềm INForm v3.5 2.2.5. Thẩm định thông số tối u (thực nghiệm) QTSX thuốc tiêm MPN đã đợc thực hiện 3 lần liên tiếp với các thành phần công thức và điều kiện sản xuất tối u. Giá trị trung bình và giá trị lý thuyết (đợc dự đoán bởi INForm) của các tính chất sản phẩm thuốc tiêm MPN đợc sản xuất với các thành phần công thức và điều kiện sản xuất tối u đợc trình bày trong bảng so sánh tính chất sản phẩm thực tế với lý thuyết. 2.2.6. Thẩm định quy trình sản xuất Thẩm định mô phỏng và thẩm định theo phơng pháp truyền thống bằng phần mềm Pharmasoft TD 10 2.2.7. Phơng pháp đánh giá chất lợng sản phẩm và xây dựng tiêu chuẩn cho chế phẩm - Định lợng hoạt chất bằng phơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao. - Kiểm tra độ pH bằng pH kế 780 Metrohm. - Kiểm tra độ ẩm bằng tủ sấy và cân. 2.2.8. Phơng pháp đánh giá độ ổn định Độ ổn định của các mẫu thuốc tiêm đông khô MPN thực nghiệm đợc bảo quản trong 2 điều kiện: - Lão hóa cấp tốc ở điều kiện: nhiệt độ 40 2 0 C, độ ẩm tơng đối 75 5% để tăng nhanh tốc độ phân huỷ, rút ngắn thời gian theo dõi đánh giá. - Theo dõi dài hạn ở điều kiện thực: + Trong tủ vi khí hậu: nhiệt độ 30 2 0 C, độ ẩm 75 5% + Trong phòng thí nghiệm: nhiệt độ và độ ẩm thay đổi theo mùa 2.2.9. Phơng pháp đánh giá tác dụng của chế phẩm Đánh giá tác dụng của chế phẩm trờn súc vật và máy móc liên quan. Chơng 3. kết quả nghiên cứu 3.1. Xây dựng công thức v quy trình sản xuất qui mô công nghiệp Từ các kết quả nghiên cứu của Nguyễn Văn Long và cộng sự, chúng tôi đã sử dụng làm cơ sở cho nghiên cứu công thức và QTSX ở qui mô công nghiệp. 3.1.1. Khảo sát lại thông số công thức: ảnh hởng của thành phần công thức (lợng hỗn hợp tá dợc độn và lợng Natri dihydrophosphat.2H 2 O) theo các mức xoay quanh trị số đã chọn đợc 11 ở qui mô thí nghiệm: x 1 : tỷ lệ hỗn hợp tá dợc độn; x 2 : lợng Natri dihydrophosphat khan (g). 3.1.2 Khảo sát lại thông số quy trình sản xuất ở nghiên cứu thí nghiệm, chúng tôi chỉ thấy có 3 thông số quan trọng cần khảo sát lại là: x 3 : nhiệt độ đông lạnh; x 4 : thời gian sấy; x 5 : áp suất buồng. 3.1.2.1. Khảo sát điểm ơtecti Bảng 3.1. Khảo sát nhiệt độ đông lạnh 0 C 15 10 5 0 -5 -10 -15 -20 -25 -28 -29 -30 x 10K 1,28 1,48 1,68 1,9 2,4 2,8 10 30 100 300 10000 100000 Qua bảng ta thấy điện trở tăng nhanh ở nhiệt độ ơtecti là khoảng -34 - 35 0 C. Vậy ta có thể xây dựng nhiệt độ đông lạnh từ -39 - 44 0 C. 3.1.2.2. Điểm nóng chảy Mục đích để xác định nhiệt độ tối đa sấy thứ cấp Bảng 3.2. Kết quả khảo sát điểm chảy Tên mẫu Lan 1 Lan 2 Lan 3 Lô 1 55 o C 57 o C 55 o C Lô 2 58 o C 57 o C 55 o C Lô 3 55 o C 56 o C 56 o C Nh vậy điểm nóng chảy trung bìnhlà: 56 o C 3.1.2.3. Quan sát bằng kính hiển vi điện tử Đã quan sát đợc cấu trúc của nguyên liệu và cấu trúc của khối. 3.1.3. Mô hình thí nghiệm: Xem 2.2.2 3.1.4. Dữ liệu thực nghiệm Các tỷ lệ hỗn hợp tá dợc x 1 đợc quy ớc với số nguyên dơng: 3 = a:Lactose 25 g + Mannitol 0g 2 = b:Lactose 20 g + Mannitol 5g 1= c: Lactose 15g + Mannitol 10g 0= d:Lactose 10g + Mannitol 15g 12 Bảng 3.3. Dữ liệu thực nghiệm (đầu vào của phần mềm FormRules) Biến T N x 1 x 2 x 3 x 4 x 5 y 1 y 2 y 3 y 4 y 5 y 6 1 d 1,6 - 36 30 0,1 2 7,40 3,00 98,5 2 1,784 2 c 1,8 - 36 15 0,2 0 7,36 2,73 93,6 2 1,832 3 b 1,8 - 40 20 0,1 1 7,56 1,38 9 7,20 2 1,755 4 b 1,4 - 32 30 0,2 1 7,26 1,80 78,9 4 0,804 5 c 1,6 - 32 20 0,25 2 7,79 1,79 108 4 0,721 6 c 1,2 - 40 30 0,15 2 7,16 2,32 97,9 2 0,652 7 a 1,2 - 32 15 0,1 0 7,18 2,60 105 4 0,848 8 a 1,6 - 40 25 0,2 0 7,36 1,39 96,5 2 0,104 9 d 1,8 - 32 25 0,15 2 7,33 2,10 106 2 0,309 10 b 1,2 - 36 25 0,25 1 7,67 1,20 108 3 0,314 11 a 1,4 - 36 20 0,15 0 7,38 1,29 103 4 1,099 12 a 1,8 - 44 30 0,25 0 7,29 1,08 91,3 2 0,685 13 b 1,6 - 44 15 0,15 1 7,39 2,38 97 2 1,270 14 c 1,4 - 44 25 0,1 1 7,27 3,56 103 2 0,310 15 d 1,2 - 44 20 0,2 2 7,16 0,84 103 2 0,242 16 d 1,4 - 40 15 0,25 0 7,39 1,30 89,7 2 0,150 Ghi chú: x 1 , x 2 , x 3 , x 4 , x 5 là các biến số đã nêu trên. y 1 : hình thức cảm quan (0 = nứt nhiều + vón; 1 = nứt nhiều; 2 = dạng khối + ít nứt) y 2 : độ pH; y 3 : độ ẩm (%) y 4 : hàm lợng hoạt chất (%) y 5 : số lợng pic tạp chất y 6 : hàm lợng tạp chất (%) 3.1.5. Phân tích liên quan nhân quả Xu hớng và mức độ liên quan: Nói chung các thông số khảo sát có ảnh hởng rõ rệt trên tính chất sản phẩm (trừ y 3 và y 6 ). xem Bảng 3.4 13 Bảng 3.4. Các xu hớng và mức độ liên quan giữa x i và y i Biến x 1 x 2 x 3 x 4 x 5 R 2 luyện y 1 + + + + + 98,8571 y 2 + - + + + 99,2970 y 3 38,7247 y 4 + + + + - 99,9492 y 5 + - + - - 76,9634 y 6 38,3503 a) Hình thức cảm quan (y 1 ) bị ảnh hởng rõ nét bởi tất cả 5 biến độc lập Nói chung, muốn cho hình thức cảm quan (y 1 ) của sản phẩm đạt yêu cầu (dạng khối, ít nứt) thì yêu cầu các biến độc lập phải có giá trị nh sau: - Tỷ lệ hỗn hợp tá dợc độn (x 1 ): a = (Lactose 25 g + Mannitol 0 g). - Lợng natri dihydrophosphat (x 2 ): cao. - Nhiệt độ đông lạnh (x 3 ): thấp. - Thời gian sấy (x 4 ): từ trung bình hay kéo dài. - áp suất buồng (x 5 ): tùy ý b) Độ pH (y 2 ) bị ảnh hởng rõ nét bởi biến độc lập (trừ x 2 ) Nói chung, độ pH của chế phẩm (y 2 ) có thể bị ảnh hởng bởi tỷ lệ tá dợc độn, không bị ảnh hởng bởi lợng Natri dihydrophosphat, bị ảnh hởng khá phức tạp bởi các điều kiện sản xuất (nhiệt độ đông lạnh, thời gian sấy và áp suất buồng). c) Sự ảnh hởng của các thành phần công thức và điều kiện sản xuất (x 1 ) trên độ ẩm của sản phẩm (y 3 ) không đáng kể. d) Hàm lợng hoạt chất trong sản phẩm (y 4 ) bị ảnh hởng rõ nét bởi các biến độc lập (trừ x 5 ): Nói chung, nếu muốn hàm lợng hoạt chất (y 4 ) cao đòi hỏi các điều kiện: 14 - Tỷ lệ hỗn hợp tá dợc độn (x 1 ): a = (Lactose 25 g + Mannitol 0 g). - Lợng Natri dihydrophosphat (x 2 ), nhiệt độ đông lạnh (x 3 ) và thời gian sấy (x 4 ) phải đợc chọn phù hợp e) Số lợng pic tạp chất (y 5 ) bị ảnh hởng khá rõ nét chỉ bởi hai biến độc lập gồm x 1 và x 3 : Nói chung, nếu muốn ít có số lợng pic tạp chất thì có thể chọn tỷ lệ hỗn hợp tá dợc độn (x 1 ) là d (Lactose 10 g + Mannitol 15 g) đồng thời phải áp dụng nhiệt độ đông lạnh (x 3 ) cao; ngợc lại, có thể chọn tỷ lệ hỗn hợp tá dợc độn (x 1 ) là a (Lactose 25 g + Mannitol 0g) đồng thời phải áp dụng nhiệt độ đông lạnh (x 3 ) thấp. f) Đối với hàm lợng tạp chất: Sự ảnh hởng của các thành phần công thức và điều kiện sản xuất (x i ) không đáng kể. 3.1.6. Tối u hóa 3.1.6.1 Điều kiện tối u hóa Hàm mục tiêu đối với y i : - Hình thức cảm quan: không nứt y 1 = Up (mid 1 = mid 2 = 1,99) - Độ pH: 7,3-7,4 y 2 = Tent (mid 1 = 7,3; mid 2 = 7,4) - Hàm lợng hoạt chất (%): tối đa y 4 = Up - Số lợng pic tạp chất: tối thiểu y 5 = Down (mid 1= 2,01; mid 2 = 2,01) 3.1.6.2. Kết quả tối u hóa Thông số tối u: x 1 : tỷ lệ hỗn hợp tá dợc độn = 3 (Lactose 25 g + Mannitol 0 g) x 2 : lợng natri dihydrophosphat khan. (g) = 1,55g x 3 : nhiệt độ đông lạnh = -38,78 # 39 o C x 4 : thời gian sấy = 27.31 # 27 giờ ; x 5 : áp suất buồng = 0,14 mbar Tính chất dự đoán: y 1 : Hình thức cảm quan = 3,40 2 (dạng khối + ít nứt) y 2: Độ pH = 7,32; y 4: Hàm lợng hoạt chất: 103,35 % 15 y 5 = Số lợng pic tạp chất: 1,93 2 (tối thiểu) 3.1.6.3. Điều chỉnh thông số máy đông khô GZL-6 Để phù hợp với thiết bị sản xuất trên quy mô công nghiệp với cỡ lô 10.000 lọ, đồng thời để tăng tính ổn định của sản phẩm, chúng tôi đã thiết kế lại các thông số trên máy đông khô GZL-6 hiện có. Qua thực nghiệm đã tìm đợc thông số sau: Thuốc tiêm đông khô MPN đợc pha chế theo quy trình (phụ lục 9). Với các thông số kỹ thuật của quá trình đông khô nh sau: - Đông lạnh mẫu trong 2 giờ với nhiệt độ giá đỡ - 39 0 C. - Giai đoạn làm khô sơ cấp: + Bật ngng tụ 1 và ngng tụ 2 để chạy lạnh condensor đạt -55 0 C. Đồng thời bật dẫn nhiệt. + Sau khi dẫn nhiệt 1 giờ, bắt đầu hút chân không, cài áp suất buồng 0,14mbar, duy trì trong 1 giờ, sau đó tiến hành gia nhiệt từ - 39 - 15 0 C trong 13 giờ: tổng giai đoạn làm khô sơ cấp là 15 giờ. - Giai đoạn sấy khô thứ cấp: Khoảng 27giờ, nhiệt độ sấy 35 0 C, theo chơng trình cài đặt nhiệt tăng dần nh sau: Bảng 3.9. Nhiệt độ và thời gian sấy khô thứ cấp Nhiệt độ giá đỡ ( 0 C) Thời gian (giờ) -10 4 -5 6 0 4 5 4 15 2 30 4 35 3 3.1.6.4. Thẩm định kết hợp tối u hóa QTSX thuốc tiêm MPN đã đợc thực hiện 3 lần liên tiếp với các thành phần công thức và điều kiện sản xuất tối u. Kết quả kiểm chứng đợc trình bày trong Bảng 3.10. 16 Bảng 3.10. So sánh tính chất sản phẩm của 3 lô sản xuất Tính chất sản phẩm Lô 1 (0104) Lô 2 (0204) Lô 3 ( 0304) Hình thức cảm quan 2 2 2 Độ pH 7,37 7,32 7,35 Hàm lợng hoạt chất 103% 96,6% 101,2% Số lợng pic tạp chất 2 2 2 Qua thực nghiệm cho thấy QTSX thuốc tiêm MPN với các thành phần công thức và điều kiện sản xuất tối u đã đợc chứng minh là phù hợp không những trong lý thuyết mà còn trong thực tế. 3.2. Thẩm định Quy trình sản xuất 3.2.1. Thẩm định mô phỏng Kết quả thẩm định mô phỏng của 3 lô liên tiếp cho kết quả theo Bảng 3.12. Kết quả thẩm định mô phỏng Số lô Lợng mẫu quan sát (lọ) Tỷ lệ tạp nhiễm (%) Kết luận 0104 4998 0,06 Đạt 0204 4957 0,06 Đạt 0304 5000 0,06 Đạt Nh vậy mức tạp nhiễm < 0,1% cho cả 3 lô nên quy trình đạt độ vô khuẩn cho sản xuất thuốc vô trùng. 3.2.2. Thẩm định quy trình sản xuất thuốc tiêm bột đông khô soli - medon 3.2.3. Ap dụng mô hình A 3.2.3.1. Đối tợng thẩm định: QTSX thuốc tiêm đông khô Soli- Medon tại công ty Bidiphar (3 lô 0104, 0204, 0304). 3.2.3.2. Dữ liệu thực nghiệm: Thông số kiểm soát: Khối lợng bột sau khi đông khô đợc chọn làm thông số kiểm soát quy trình, đây là thông số quan trọng liên quan đến hàm lợng hoạt chất trong thành phẩm. Dữ liệu về khối lợng bột của 3 lô đợc trình bày trong Phụ lục1. 17 3.2.3.3. Kết quả thẩm định trớc của các thông số trọng yếu: Từ các dữ liệu thực nghiệm đợc nêu và đối chiếu với yêu cầu, kết quả thẩm định của các thông số đợc trình bày tóm tắt trong Bảng 3.14. Bảng 3.14. Tóm tắt kết quả thẩm định các thông số trọng yếu TT Giai đoạn Thông số Yêu cầu KQ 1 Xử lý lọ rỗng Độ trong Phải trong suốt Đạt 2 Độ pH 7,0- 8,0 Đạt 3 Độ phân tán hàm lợng CV < 2% Đạt 4 Pha chế - lọc Độ trong Phải trong suốt Đạt 5 Độ trong Theo DĐVN III, PL 5.12 Đạt 6 Đóng lọ Độ đồng đều thể tích 10% thể tích trung bình Đạt 7 Hình thức cảm quan Lọ kín chứa khối bột đôn g khô màu trắn g , khôn g teo vón, không nứt bể Đạt 8 Độ ẩm (%) 2% Đạt 9 Độ đồng đều khối lợng bột 10% khối lợng trung bình Đạt 10 Độ phân tán hàm lợng CV < 2% Đạt 11 Độ pH sau khi hoà tan lại 7,0- 8,0 Đạt 12 Thời gian hòa tan lại Các g iá trị p hải đồn g nhất g iữ a 3 lô Đạt 13 Độ trong sau khi hoà tan lại Theo DĐVN III, PL 5.12 Đạt 14 Độ vô khuốn Đạt yêu cầu theo chuyên luận Đạt 15 Đông khô - khằn nắp nhôm Nội độc tố 0,17 UI/ mg Đạt 3.2.3.4. Kết quả thẩm định trớc của thông số kiểm soát: Khảo sát biểu đồ Shewhart X TB / R Khảo sát biểu đồ Cusum Khảo sát chỉ báo hiệu năng Tất cả các khảo sát này đều đạt 18 3.2.4. áp dụng mô hình B Bảng 3.19. Kết quả khảo sát biểu đồ p Trắc nghiệm Lô 0104 Lô 0204 Lô 0304 Biểu đồ p Đạt Đạt Đạt Nhận xét: Tỷ lệ lọ thuốc không đạt độ trong trong quá trình đóng dịch vào lọ của 3 lô 1, 2 và 3 đều đợc kiểm soát. 3.3. Nghiên cứu đánh giá chất lợng sản phẩm v xây dựng tiêu chuẩn 3.3.1. Nghiên cứu định lợng Methylprednisolon natri succinat trong chế phẩm bằng phơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao 3.3.1.1. Nghiên cứu điều kiện tách pic Methylprednisolon natri succinat bằng phơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao Trong quá trình phân tích nhận thấy các pic trong sắc ký đồ của mẫu chuẩn và mẫu thử (trong công thức chứa MPN với các tá dợc) nh sau: các pic Methylprednisolon hemisuccinat, pic Fluorometholon, và pic Methylprednosolon đợc tách rời, nhọn, đối xứng, thời gian lu có độ lặp lại tốt, ổn định. Khảo sát tính tơng thích hệ thống đạt theo yêu cầu quy định 3.3.1.2. Tính đặc hiệu: Sắc ký đồ cho thấy tính đặc hiệu của qui trình phân tích định tính. 3.3.1.3. Khảo sát sự tơng quan tuyến tính giữa nồng độ Methylprednisolon hemisuccinat và diện tích pic Qua khảo sát kết quả cho thấy giữa diện tích pic và nồng độ Methylprednisolon hemisuccinat có sự phụ thuộc tuyến tính chặt chẽ 3.3.1.4. Khảo sát độ chính xác: Để khảo sát độ lặp lại của phơng pháp, tiến hành định lợng thành phần MPN trong mẫu thuốc đông khô với 6 thí nghiệm riêng biệt bằng phơng pháp đã chọn. Qua kết 19 quả thống kê cho thấy phơng pháp có độ lặp lại tốt, thể hiện qua độ lệch chuẩn tơng đối nhỏ RSD = 0,69%. 3.3.1.5. Khảo sát độ đúng: Tiến hành xác định độ đúng bằng phơng pháp thêm chuẩn. Thêm chính xác một lợng Methylprednisolon hemisuccinat vào mẫu thử tơng ứng với 90%, 100% và 110% so với hàm lợng ghi trên nhãn. Kết quả thu đợc cho thấy, phơng pháp có độ đúng cao, tỷ lệ tìm thấy 100,61%. 3.3.1.6. Khảo sát giới hạn phát hiện (Detection limit): Giới hạn phát hiện là 1% của giới hạn định lợng (5 g/1ml). 3.3.2. Xây dựng tiêu chuẩn chất lợng của thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natri succinat theo USP 30: Đã xây dựng đợc tiêu chuẩn thuốc tiêm đông khô Soli-medon theo USP 30. 3.4. Độ ổn định của chế phẩm thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natri succinat 3.4.1. Độ ổn định của chế phẩm thuốc khi bảo quản trong điều kiện lão hóa cấp tốc Bảng 3.23. Kết quả đánh giá độ ổn định của thuốc tiêm đông khô MPN bảo quản ở điều kiện lão hóa cấp tốc Lô 01 Chỉ tiêu đánh giá 0 3 6 9 12 15 tháng Tính chất cảm quan Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Sai số KL ( 10% KL trung bình) Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt MKLDSK (giới hạn: 2%) 1,29 1,58 1,68 1,80 1,92 2,03 Độ trong Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt pH (giới hạn: 7,0 8,0) 7,37 7,46 7,27 7,54 7,60 7,55 Hàm lợng DC (giới hạn: 90-110%) 100,5 99,89 97,14 95,16 94,5 93,0 Tạp chất liên quan (giới hạn: 6,6%) 0,7 1,5 3,3 4,9 5,1 5,5 Lô 02; lô 03 cũng cho kết quả đạt 20 Kết quả theo dõi độ ổn định trên cho thấy chế phẩm thuốc tiêm đông khô MPN ổn định khi bảo quản trong điều kiện lão hóa cấp tốc (40 2 0 C, độ ẩm tơng đối 75 5%) trong thời gian 15 tháng ( > 36 tháng điều kiện thờng), các chỉ tiêu đợc đánh giá đều đạt yêu cầu chất lợng theo USP 26 (Vì tiến hành từ năm 2004). 3.4.2. Độ ổn định của thuốc khi bảo quản trong điều kiện thực Theo dõi đánh giá độ ổn định của 3 lô thuốc trên khi bảo quản dài hạn trong điều kiện thực trong tủ vi khí hậu có nhiệt độ 30 2 0 C, độ ẩm 75 5%. Bảng 3.24. Kết quả đánh giá độ ổn định của thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natri succinat bảo quản ở điều kiện thực, trong tủ vi khí hậu, nhiệt độ 30 2 0 C, độ ẩm 75 5%. Lô 01 Chỉ tiêu đánh giá 0 3 6 9 12 18 24 36 tháng T ính chất cảm q uan Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Sai số KL Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt M KLDSK (%) 1,29 1,38 1,49 1,61 1,75 1,82 1,89 1,99 Đ ộ tron g Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt p H 7,37 7,42 7,47 7,39 7,39 7,43 7,55 7,45 H àm lợn g DC (%) 100,5 3 99,89 99,56 99,92 96,38 95,43 94,12 93,5 T ạ p chất liên q uan ( 6,6%) 0,7 0,8 - - 3,3 - 4,7 5,6 N ội độc tố Đạt - - - - - Đạt Đạt Đ ộ vô khuẩn Đạt - - - - - Đạt Đạt Lô 02; lô 03 cũng cho kết quả đạt. Kết quả theo dõi đánh giá độ ổn định của chế phẩm thuốc tiêm đông khô MPN khi bảo quản dài hạn ở điều kiện thực trong tủ vi khí hậu có nhiệt độ 30 2 0 C, độ ẩm 75 5% cho thấy thuốc ổn định trong thời gian đã theo dõi đợc là 36 tháng. [...]... quả nghiên cứu tác dụng giảm đau của Soli - Medon trên tổ chức viêm Qua kết quả nghiên cứu đạt đợc và dựa theo mục tiêu đề tài, có thể rút ra một số kết luận sau: Qua khảo sát cho thấy tỷ lệ phần trăm tăng ngỡng đau so với lô 1 Về nghiên cứu xây dựng công thức và QTSX thuốc tiêm đông chứng ở lô dùng Soli - Medon nghiên cứu lần lợt là 72,94% và khô Methylprednisolon natri succinat 40mg/ lọ với quy mô... minh thuốc có hạn dùng 36 tháng ở điều kiện khí hậu Việt Nam Đề tài đã nghiên cứu và nâng cấp tiêu chuẩn kiểm nghiệm của chế phẩm từ TCCS lên tiêu chuẩn USP 30 (2007) Đề tài cũng đã đánh giá chất lợng của thuốc sau 36 tháng sản xuất so với một số thuốc nớc ngoài và cho kết quả tơng đơng 4 Đề tài lần đầu tiên trong nớc đánh giá tác dụng thuốc tiêm đông khô MPN về lĩnh vực an toàn và so sánh với thuốc. .. áp dụng khi đăng 27 ký sản xuất, nhất là cho các chế phẩm đông khô Đề tài lần đầu tiên đã xây dựng quy trình mô phỏng và có thể áp dụng cho việc thẩm định các QTSX thuốc vô trùng, lần đầu tiên đề tài xây dựng cơ sở lý thuyết và tài liệu cho thẩm định thuốc tiêm đông khô 3 Đề tài đã xác định đợc tuổi thọ của chế phẩm nghiên cứu, nâng cao và theo dõi tuổi thọ của thuốc từ 24 lên 36 tháng, việc nghiên cứu. .. với máy đông khô mới quy mô khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) 10.000 lọ/mẻ tức lớn hơn thí nghiệm 50 lần Kết quả nghiên cứu cho Qua khảo sát cho thấy chế phẩm có tác dụng kháng viêm và giảm đau rõ rệt, tác dụng trên các động vật thí nghiệm có tác dụng tơng đơng với sản phẩm Solu - Medrol của Bỉ thấy có thể dùng phần mềm tối u hóa để áp dụng đa vào sản xuất những sản phẩm đã nghiên cứu ở... succinat nghiên cứu với chế phẩm thuốc nhập khẩu về một số chỉ tiêu Bảng 3.27 Kết quả so sánh một số chỉ tiêu của 3 mẫu thuốc tiêm đông khô MPN của các nớc Mẫu thuốc Soli-medon SX: 10/2004 Solu-Medrol SX: 11/2004 Mẫu Italia SX: 09/2004 Đánh giá sau 36 tháng kể từ khi sản xuất Cảm quan Độ tan Độ trong pH Hàm lợng DC so với ghi nhãn Bánh thuốc Tan hoàn Trong 7,6 94,2 màu trắng toàn Bánh thuốc Tan hoàn Trong... Đề tài đã đa ra những nghiên cứu cơ bản trong lĩnh vực sản xuất thuốc đông khô nh khảo sát điểm ơtecti, điểm nóng chảy để thiết lập nhiệt độ đông khô và nhiệt độ sấy thích hợp Đề tài cũng đã khảo sát cấu trúc của sản phẩm từ nguyên liệu cho đến chế phẩm để làm sáng tỏ u điểm của sản phẩm đông khô là độ hòa tan nhanh.ứng dụng này có thể dùng để cải thiện độ hòa tan của một số thuốc nhằm tăng hiệu quả... sản xuất về một số chỉ tiêu vật lý tăng, sự thay đổi có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 và hóa học đã đánh giá 3.5.2.2 ảnh hởng của Soli - Medon đối với điện tim thỏ thí nghiệm khi dùng 3.5 Nghiên cứu tác dụng DƯợc lý của chế phẩm dài ngày 3.5.1 Kết quả nghiên cứu độc tính cấp của Soli - Medon theo đờng tiêm bắp Thực nghiệm cho thấy: so sánh giữa các thời điểm thí nghiệm trớc và sau thì các thông số (tần... thức thuốc tiêm đông khô MPN Đây là lĩnh vực mới, lần đầu tiên đợc áp dụng trong thực tiễn sản xuất Việc này đạt đợc 2 mục tiêu, có ý nghĩa rất lớn cho các cơ sở sản xuất tiết kiệm đợc chi phí nghiên cứu và xây dựng đợc một quy trình tối u, ổn định Bằng phơng pháp thẩm định theo truyền thống chúng tôi đã chứng minh quy trình tìm đợc qua tối u hóa là ổn định Đề tài cũng xây dựng đợc mô hình thẩm định và. .. và so sánh với thuốc nớc ngoài về tác dụng kháng viêm, giảm đau trên súc vật và kết quả qua xử lý thống kê cho thấy hiệu quả tơng đơng Đề xuất Do thời gian và trang thiết bị còn hạn chế nên chúng tôi đề xuất thêm một số nội dung nghiên cứu khi có điều kiện: - áp dụng thêm các kỹ thuật cho việc nghiên cứu đông khô Những loại này bao gồm kỹ thuật nhiễu xạ bột tia X đông khô, kỹ thuật soi kính hiển vi quét... Việc đánh giá độ ổn định theo mùa cũng đợc khảo sát và cho kết Bảng 3.28 Kết quả nghiên cứu độc tính cấp của Soli - medon quả độ ổn định cũng trên 36 tháng trên chuột nhắt trắng 3.4.3 Độ ổn định của thuốc khi pha lại thành dung dịch Kết quả cho thấy khi thuốc tiêm đông khô MPN pha thành dung dịch chỉ ổn định trong vòng 24 giờ 3.4.4 So sánh chất lợng của thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon natri succinat . 1 Bộ giáo dục và đào tạo Bộ quốc phòng Học viện quân y Lê Công Nhờng NGHIêN CứU hoàn thiện quy trình Sản xuất Và đánH GIá một số TáC DụNG dợc lý THUốC TIêM đôNG KHô METHYLPREDNISOLON. thế dần thuốc nhập ngoại cho chế phẩm chứa hoạt chất này, tôi thực hiện đề tài luận án: Nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất và đánh giá một số tác dụng dợc lý thuốc tiêm đông khô Methylprednisolon. hai mẫu thuốc tiêm đông khô nhập khẩu của nớc ngoài sản xuất về một số chỉ tiêu vật lý và hóa học đã đánh giá. 3.5. Nghiên cứu tác dụng DƯợc lý của chế phẩm 3.5.1. Kết quả nghiên cứu độc