Đang tải... (xem toàn văn)
BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TPHCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ KỸ THUẬT MÔI TRƯỜNG Môn: CÁC HOẠT CHẤT SINH HỌCĐỀ TÀITÁCH CHIẾT FLAVONOID TỪ DIẾP CÁGVHD: Lại Đình BiênLỚP: 12CDSH2NHÓM: FLAVONOIDtổng quan về tài liệu1.1 Tổng quan về thực vật:Cây Diếp cá còn có tên là cây Giấp cá, Lá giấp, Ngư tinh thảo. Tên khoa học là Houttuynia cordata ThunbTên tiếng Anh của nó là heartleaf (lá hình tim) hay lizardtail (đuôi thằn lằn).Phân loại:Giới Thực vật (Plantae) - Ngành Ngọc lan (Magnoliophyta) - Lớp Ngọc lan (Magnoliopsida) - Bộ Hồ tiêu (Pip rals) - Họ Lá giấp (Saururac a ) - Chi Diếp cá (Houttuynia Thunb.) - Diếp cá (Houttuynia cordata Thunb.) - Phân lớp Ngọc lan (Magnoliida ) 1.1.1 Mô tả thực vật : Cây thuộc thảo, thân ngầm, rễ mọc ở các đốt. thân trên mặt đất mọc đứng cao 40cm, có long. Lá hình tim, mền nhẵn, mặt dưới tím nhạt, khi vò có mùi tanh như cá do đó có tên là diếp cá hay ngư tinh thảo. Cụm hoa là bông, màu vàng không có hoa, có 4 lá bắc trắng; tất cả nhìn như một cái hoa đơn độc. Quả nang mở ở đỉnh, hạt hình trái xoan, nhẵn 1.1.2 Phân bố, sinh thái Phân bố từ Nhật Bản, Trung Quốc tới Nêpan, Ấn Độ, các nước Đông Dương và Indonsia. Ở nước ta, cây mọc rất phổ biến. Cây mọc hoang ở những nơi ẩm thấp. Ở miền Nam được trồng nhiều làm rau sống.
BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TPHCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ KỸ THUẬT MÔI TRƯỜNG Môn: CÁC HOẠT CHẤT SINH HỌC TÁCH CHIẾT FLAVONOID TỪ DIẾP CÁ GVHD: Lại Đình Biên LỚP: 12CDSH2 NHÓM: FLAVONOID 1.1 Tổng quan về thực vật: Cây Diếp cá còn có tên là cây Giấp cá, Lá giấp, Ngư tinh thảo. Tên khoa học là Houttuynia cordata Thunb Tên tiếng Anh của nó là heartleaf (lá hình tim) hay liza rdtail (đuôi thằn lằn) - Giới Thực vật (Plantae) - Ngành Ngọc lan (Magnoliophyta) - Lớp Ngọc lan (Magnoliopsida) - Bộ Hồ tiêu (Pip rals) - Họ Lá giấp (Saururac a ) - Chi Diếp cá (Houttuynia Thunb.) - Diếp cá (Houttuynia cordata Thunb.) - Phân lớp Ngọc lan (Magnoliida ) [...]... Duoclieu.org (http://www.duoclieu.org/2012/02 /diep- ca- houttuynia-cordata-thunb-ho-la.html) Doc.edu.vn(http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-ky-thuat -chiet- xuat-va-phan-lap -flavonoid- tu- cay -diep- ca- 8673/ ) Kew.org (http://www.kew.org/plants-fungi/Houttuynia- cordata.htm) ... chiết theo mong muốn, ta có thể thay thế bằng một dung môi khác Trong hầu hết các trường hợp, hỗn hợp 2 dung môi là thích hợp cho sự phân tách các hỗn hợp, khi đó hỗn hợp 3 hay 4 dung môi là không cần thiết 4.1 Kết luận: Chiết suất: từ 6 kg dượcliệu đã chiết ngấm kiệt với cồn 96% thu được 54g cao A2, cao A2 chứa hàm lượng lớn flavonoid Phânlập: Từ 50g cao A2 tiến hành phân lập các flavonoid bằng... cyannidin và sắc ký lớp mỏng Kết quả: phân đoạn 2 – cao A2 giàu flavonoid so với phân đoạn 1 và phân đoạn 3, do đó A2 được dùng để phân lập các flavonoid bằng sắc ký cột Phân lập flavonoid từ cao A2 bằng SKC chân không Thăm dò hệ dung môi trên sắc ký lớp mỏng Khảo sát một số hệ dung môi, tiến hành thăm dò trên sắc ký lớp mỏng tráng sẵn (silica gel F254), phát hiện bằng TT FeCl3 5%, soi UV 254nm,... ký cột chân không, tuy nhiên cần phải có máy móc hiện đại, điều này không phải cơ sở sản xuất Dược phẩm nào cũng được, nên khó được áp dụng rộng rãi hơn so với phương pháp sắc ký chân không Trong bài tiểu luận của nhóm có tham khảo và sử dụng một số hình ảnh từ Google, một số tài liệu từ sách Hóa Sinh Học và từ INTERNET Duoclieu.org (http://www.duoclieu.org/2012/02 /diep- ca- houttuynia-cordata-thunb-ho-la.html)... thu hồi dung môi được cao lỏng A2 (54 g) A2 được dùng làm mẫu để phân lập các flavonoid bằng sắc ký cột nhanh (VLC) Dịch A còn lại tiếp tục được lắc phân bố với nbutanol đến khi dịch nbutanol không còn cho màu xanh đen với TT FeCl3 3,5% Dịch n-butanol thu được, rửa nước nhiều lần, gộp các dịch n-butanol, cô thu hồi dung môi được cao A3 (7 g) Định tính flavonoid trong các cao A1, A2, A3 bằng phản... được dùng để tiến hành triển khai trên sắc ký cột chân không Tuy nhiên do không có mặt của acid formic nên các vết tách kéo đuôi, do đó silica gel sẽ được tầm 5% acid formic để tách gọn hơn Phân lập flavonoid bằng sắc ký cột chân không Điều kiện sắc ký - Cột thuỷ tinh xốp 5x30cm, đã xử lí bằng sulfucromic, rửa sạch, sấy khô - Pha tĩnh: Silica gel 60, cỡ hạt 0,015-0,04 mm, khôi lượng 150g, được tẩm... nước (15:5) - Nhồi bột: Nhồi bột khô, sau đó cho 15ml pha động chảy qua cột , hút chân không đến khi không còn dung môi - Khối lượng mẫu: 25g cao A2 - Nạp mẫu dạng dung dịch Mẫu được nạp đều lên bề mặt silica gel, hút chân không đến khi mẫu thấm hết xuống silica gel, sau đó tiến hành hứng phân đoạn - Thể tích hứng mỗi phân đoạn là 150ml - Kiểm tra các phân đoạn trên bảng sắc ký lớp mỏng tráng sẵn với... quả phân lập flavonoid bằng dung môi butyl acetat- nước (15:5) A B _ C _ D _ E _ F _ G _ H _ _ I _ _ J 3 _ 4 _ 5 TP _ 1 2 Nhận xét: Phân đoạn 1 (1,1g) được kết tinh trong methanol thu được tinh thể tinh thiết màu vàng chanh , đặt tên là DC1 (34mg) Tinh thể được kiểm tra trên sắc ký lớp mỏng qua 4 hệ dung môi khác nhau ethyl acetat-nước-acid formicacetic (100:10:5:5),... phân lập chat G thì cần phải khảo sát lại hệ dung môi khai triển mà không có mặt của acid Các phân đoạn còn lại do khối lượng ít và có nhiều vết nên không tiếp tục nghiên cứu Phân đoạn Chất tinh khiết Đặc điểm Khối lượng (mg) 1 DC1 Vàng chanh 34 2 DC2 Vàng tươi 450 Bảng 3.2 chất tinh chiết thu được từ các phân đoạn cột 1 Mục đích: Để tiếp tục phân lập chất G hay các flavonoid còn lại trong cao A2,... tách tốt nhất và Rf thích hợp Điều kiện sắc ký Cột thủy tinh xốp 5 x 30 cm, đã sử lý bằng sulfocromic, rửa sạch, sấy khô Pha tĩnh: Silica gel 60, cỡ hạt 0.015- 0.04mm, khối lượng 150g Pha động: Ethyl acetat – aceton – H2O (8:1,9:0,1) Khối lượng mẫu: 25g cao A2 Nạp mẫu: nạp mẫu khô Thể tích hứng mỗi phân đoạn là :150 ml Kiểm tra các phân đoạn trên bảng sắc ký lớp mỏng tráng sẵn với hệ . – cao A2 giàu flavonoid so với phân đoạn 1 và phân đoạn 3, do đó A2 được dùng để phân lập các flavonoid bằng sắc ký cột. Phân lập flavonoid từ cao. n-butanol, cô thu hồi dung môi được cao A3 (7 g).