Luận văn : Ứng dụng kỹ thuật RT - PCR xác định Macrobrachium rosenbergii nodavirus (MrNV) và Extra small virus (XSV) trên tôm càng xanh (Macrobrachium rosenbergii) part 1 pps

... ca 35.7 13 gi|5 411 110 5|dbj|AB177633 .1| Chuzan virus gene for outer capsi 35.7 13 gi|5 411 110 1|dbj|AB1776 31. 1| D'Aguilar virus gene for outer ca 35.7 13 gi|5 411 1099|dbj|AB177630 .1| D'Aguilar ... 0,54 1, 05 1, 44 1, 13 0,72 0,46 0,54 1, 04 0, 41 Mẫu 12 13 14 15 16 17 18 19 10 21 22 S/P 0,5 0,88 1, 18 1, 41 0,64 0,62 0,3 0,89 1, 24 1, 13 0,24 S/P≥ 0, 4: Dương tính; ... gi|30 315 3 61| gb|AF 512 378 .1| Porcine respiratory and reproducti 35.7 13 gi |12 92880|emb|Z66548 .1| PVLSOTKMO Puumala virus segment L, genom 35.7 13 gi|5 411 111 1|dbj|AB177636 .1| D'Aguilar virus...

... trình ứng dụng RT- PCR trong việc phát hiện virus PRRS, khử băng phụ và giảm các thành phần phản ứng nhằm làm giảm giá thành cho một phản ứng xét nghiệm. Thực hiện phản ứng RT- PCR phát hiện virus ... PRRSV 4 .1. 1. RT- PCR với Taq beat Đầu tiên, để thiết lập quy trình RT- PCR, chúng tôi đã tiến hành phương pháp RT- PCR một bước trên mẫu chuẩn (quy trình đã được mô tả bên trên) , sử dụng cặp ... Rovira và Taq Beat Hot Start. Kết quả được thể hiện trong hình 4 .1. Hình 4 .1. Sản phẩm RT- PCR trên mẫu RNA chuẩn khi dùng Taq Beat. Ghi ch : Lad: Thang chuẩn Nồng độ gel: 1% Mẫu 1: Mẫu chuẩn...

... Bước 5: Hòa tan RNA - Hoà tan khối RNA trong 10 l nước không có chứa RNase. Giữ ở -2 00C cho đến khi sử dụng 23 3.5.5. Kỹ thuật RT- PCR trên RNA của virus Để thực hiện phản ứng phiên ... phản ứng RT- PCR Bảng 3. 3: Chu kỳ nhiệt cho phản ứng RT- PCR Bƣớc Hoạt động Nhiệt độ Thời gian 1 Phiên mã ngược 480C 30 phút 2 Tiền biến tính 950C 10 phút 3 Biến tính 950C 15 ... phòng. Bước 2: Phân tách và tinh sạch RNA - Thêm 0.2 ml chloroform và vortex để trộn đều. Để ổn định trong 10 phút ở nhiệt độ phòng. - Ly tâm với tốc độ 10 000 vòng/phút trong 15 giây ở 40C...

... (205/240), nhưng chỉ có 11 /14 0 mẫu máu chứa lượng virus có thể phát hiện được bằng RT- PCR. Ông kết luận kết quả phản ứng RT- PCR phụ thuộc rất nhiều vào mẫu phân tích (7).Wagstrom và cộng sự trong ... sử dụng một cách trực tiếp trong việc phân tích các mẫu bệnh phẩm. Fun In Wang (19 94) đã sử dụng kỹ thuật RT- PCR trực tiếp để phát hiện sự tồn tại của virus PRRS trong xác heo thương phẩm và ... và sử dụng trong việc định lượng mức độ biểu hiện của gene. Ngoài ra, RT- PCR còn có một ứng dụng quan trọng nữa đó là chúng được sử dụng trong việc chẩn đoán các bệnh do virus RNA. 2.4.1...

... Nguyễn Ngọc Hải và PGS.TS Trần Thị Dân, chúng tôi thực hiện đề tài: Ứng dụng kỹ thuật RT - PCR để phát hiện virus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn”. 1 1. 2. Mục tiêu ... khăn và mất nhiều thời gian. Cho đến những năm gần đây, kỹ thuật sinh học phân tử đã phát triển một cách mạnh mẽ và chứng minh được vai trò ưu việt, trong đó kỹ thuật PCR ngày càng được ứng dụng ... giữa trận dịch ở Đức và ở Mỹ (Anoon, 19 91) . Căn bệnh này cũng được báo cáo ở Netherlands vào tháng 1 năm 19 91 và ở Belgium vào tháng 3 năm 19 91 (OIE, 19 92). Trường hợp đầu tiên của bệnh phát...

... trên gel biến tính 24 3.5.5. Phương pháp RT- PCR trên RNA virus 25 3.5.6. Điện di sản phẩm RT- PCR 27 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4 .1. Kết quả RT- PCR trên mẫu chuẩn của PRRSV 28 4 .1. 1. ... 4 .1. 1. RT- PCR với Taq beat hot start (Promega) 28 4 .1. 2. RT- PCR với Taq polymerase của Biorad và ABgene 29 4.2. Kết quả RT- PCR trên mẫu RNA ly trích 30 4.2 .1. RT- PCR với Taq beat hot start trên ... pháp RT- PCR 16 2.4 .1. Nguyên tắc của phản ứng RT- PCR 16 2.4.2. Các enzyme sử dụng cho phiên mã ngược 16 2.4.3. Các primer trong phiên mã ngược 18 PHẦN III: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP 20 3 .1. ...