Phương pháp xác Định hoạt Độ alpha amyalase

Sinh viên nắm được nguyên lý chung xác định hoạt độ enzyme và cách tiến hành xác định hoạt độ enzyme ỏ- amylase theo phương pháp Heinkel.

BÀI 2 XÁC ĐỊNH HOẠT ĐỘ ENZYME ỏ- AMYLASE THEO PHƯƠNGPHÁP HEINKEL

- Dung dịch tinh bột chuẩn 1%: 0,5g + 50 ml đệm photphat, đun sôi đến khi dungdịch trong Định mức lên 50 ml.

2 Dụng cụ

- Máy quang phổ.- Tủ ấm.

- Pipetman 1000 l: 2 chiếc; eppendorf 1,5 ml: 20 cái

- ống nghiệm: 20 chiếc- Cốc đong 100 ml: 4 cái- Cốc đong 200 ml: 2 cái- ống đong 50 ml: 2 chiếc

- 0,5 ml dung dịch HCl 1N

- 9 ml dung dịch I2 pha loãng 150 lần.

Đo độ hấp thụ ở bước sóng 560 nm trên máy quang phổ.

2 Thí nghiệm

- 0,25 ml tinh bột 1%- 0,25 ml NaCl 0,1%- 0,5 ml đệm phosphat

- 0,25 ml tinh bột 1%- 0,25 ml NaCl 0,1%- 0,5 ml đệm phosphat

- 0,25 ml dịch enzyme

Lắc đều, ủ ở 30C trong khoảng thờigian nhất định

- Thêm 1,25 ml dung dịch HCl 1N,lắc đều để ở nhiệt phòng 5 phút.

- 1,25 ml dung dịch HCl 1N,lắc đều.

V/ NHẬN XÉT