Đang tải... (xem toàn văn)
thực hành sinh
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CỬU LONG KHOA KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH GVHD: BÙI VĂN MY TIN NHÓM THỰC HIỆN MSSV NGUYỄN THỊ HUỲNH NHƯ 1211032083 NGUYỄN THỊ HUỲNH NHƯ 1211032084 NGUYỄN THỊ TỐ NHƯ 1211032085 LÊ MINH NHỰT 1211032086 Công Nghệ Thực Phẩm A Tháng 11/2012 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Bài 1: Cách sử dụng kính hiển vi quang học I/ Mục đích yêu cầu - Nắm được nguyên tắc cấu tạo kính hiển vi quang học. - Học cách sử dụng kính hiển vi quang học. - Học cách quang sát mẫu vật dưới kính hiển vi, cách vẻ ảnh của mẫu vật được quang sát. II/ Dụng cụ và hóa chất: - Kính hiển vi - Vi mẫu để quang sát III/ Kính hiển vi quang học 1.Nguyên tắc cấu tạo Kính hiển vi được cấu tạo bằng hai hệ thống thấu kính hội tụ, mỗi hệ thống hoạt động như một kính lúp, kính lúp quay về vật quang sát gọi là vật kính, kính lúp để đặt mắt vào quan sát gọi là thị kính. Từ mẫu vật quang sát (ab), vật kính cho một ảnh thật ngược chiều (a’b’) xuất hiện phía trong mặt phẳng (f) của thị kính. Thị kính hoạt động như một kính lúp và qua thị kính sẽ quan sát được ảnh ảo (a’’b’’) được phóng đại từ ảnh thật (a’b’). Kính hiển vi quang học là một loại kính mà ánh sáng xuyên thấu qua mẫu vật; vì thế, tiêu bản phải trong suốt và mẫu vật phải được cắt lát mỏng để các tia sáng có thể xuyên thấu. Trang 2 b b’ BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Hình 1: Sơ đồ nguyên tắc cấu tạo của kính hiển vi quang học 2.Các bộ phận của kính hiển vi: kính hiển vi gồm các bộ phận chính sau: Chân kính làm bằng kim loại nặng để giữ thăng bằng cho kính. Thân kính làm giá để gắn các bộ phận khác vào và để có thể cầm được khi đi chuyển kính. Một ống kính chuyển động được, phía trên mang một hoặc hai thị kính có độ phóng đại khác nhau: 4X, 10X, 20X, 40X,… Vật kính càng dài thì độ phóng đại càng lớn. Một ốc vặn lớn (thứ cấp) dùng để vặn cho ống kính chuyển động với khoảng cách dài ( bên ngoài có thể nhìn thấy được) Trang 3 a Vật kính a’’ b’’ Thị kính a’ BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Một ốc vặn nhỏ (vi cấp) dùng để vặn cho ống kính chuyển động lên xuống với khoảng cách thật ngắn và nhìn bên ngoài không thể thấy ống kính di chuyển Bàn kính: 2 kẹp rời để giữ tiêu bản khi quan sát hoặc có bộ phận kẹp vi mẫu với 2 đinh ốc (1 dùng để di chuyển tiêu bản qua lại, 1 dùng để di chuyển tiêu bản tới lui). Giữa bàn kính có một lỗ tròn để ánh sáng đi qua. Bên dưới bàn kính là bộ phận ngưng tụ ánh sáng (tụ quang) được gắn liền với bộ phận chắn sáng và trên đó có một cần điều chỉnh độ sáng của ánh sáng. Tụ quang có thể được mở lớn hoặc nhỏ nhờ cần chắn sáng. Dưới tụ quang là bộ phận đèn chiếu sáng hoặc một gương có 2 mặt (mặt phẳng và mặt lõm) để lấy ánh sáng phản chiếu từ đèn. Thường chỉ sử dụng gương lõm. 3.Cách sử dụng: Khi sử dụng kính hiển vi phải theo đúng trình tự các bước sau: - Lau nhẹ tay bẳng vải mềm mặt trên kính, mặt dưới vật kính, bàn kính, gương hay bộ phận tụ quang. - Đặt kính hiển vi hơi lệch về phía tay trái nếu thuận tay phải và ngược lại. - Bật nguồn sang. Nếu kính không có đèn, phải đặt kính hướng về nguồn sang. - Xoay nhẹ đĩa mang vật kính để vật kính nhỏ nhất ngay quang trục đúng lúc nghe tiếng “cạch” nhỏ thì dừng lại. - Lấy ánh sáng : + Tụ quang phải ở vị trí cao nhất. + Mở hết chắn sang để ánh sang đi vào cực đại. + Hạ ống kính xuống từ từ bằng cách vặn ống thứ cấp cho đến lúc vừa cứng không vặn được nữa thì dừng lại. + Đặt mắt trái vào thị kínhđồng thời tay xoay mặt lõm của gương hướng về đèn để lấy ánh sang cho đến khi thị trường kính hiển vi được chiếu sang tối đa. Nếu kính hiển Trang 4 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM vi có bộ phận đèn thì chỉ cần bật đèn. Sau đó tuyệt đối không được xê dịch kính hiển vi nữa. Quan sát mẫu vật với vật kính 10x: - Đặt tiêu bản lên bàn kính, xê dịch bằng tay hoặc dùng hai đinh ốc nhỏ trên bộ phận kẹp để di chuyển tiêu bản đưa vi mẫu về trung tâm bàn kính ngay vị trí đượcv chiếu sang, sau đó giữ tiêu bản ở vị trí này bằng 2 kẹp. - Đặt mắt trái hoặc ca3 hai mắt vào thị kính đồng thời vặn ốc thứ cấp nâng ống kính lên từ từ và dừng lại khi thấy rõ ảnh nhất. Muốn quan sát chi tiết một phần của mẫu vật ở vật kính lớn hơn (20x, 40x….): - Mắt vẫn đặt vào thị kính vừa quan sát mẫu vật ở vật kính 10x vừa dịch chuyển phần muốn quan sát vào giữa thị trường, sau đó xoay đĩa mang vật kính sang 20x hay 40 x đến ngay quang trục khi nghe tiếng “cạch” là được. - Vặn ốc vi cấp để điều chỉnh cho ảnh rõ nhất. Tuyệt đối không được dùng ốc thứ cấp khi sử dụng các vật kính có độ phóng đại lớn để tránh làm bể tiêu bản và hỏng vật kính. Sau khi quan sát xong muốn lấy tiêu bản ra khỏi vật kính, phải: - Xoay sang vật kính ngắn nhất hay vật kính 10x về ngay quang trục. - Mở bộ phận kẹp và lấy tiêu bản ra khỏi bàn kính. - Lau khô đầu các vật kính và đậy kính hiển vi lại. 4.Bài phúc trình: • Vẽ vài tế bào hồng cầu ở vật kính 10X, 1 tế bào hồng cầu ở vật kính 40X. • Vẽ vài hạt phấn bông búp ở vật kính 10X • Trả nời ngắn các câu hỏi: Trang 5 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM 1. Những lổi khi quan sát dưới kính hiển vi vật kính 10X nhưng không được ảnh của vật mẫu là : không đưa vi mẫu vào đúng trung tâm của bàn kính,không điều chỉnh tụ quang hợp lý để thu ánh sáng. 2. - Các bước quan sát mẫu vật dưới kính hiển vi ở vật kính 10X : đặt tiêu bản lên bản lên bàng kính ,xê dịch bằng tay hay bằng 2 đinh ốc nhỏ trên bộ phận kẹp để di chuyển tiêu bản đưa vi mẫu vào trung tâm bán kính ngay vị trí được chiếu sáng,sau đó giữ tiêu bản ở vị trí này bằng 2 kẹp. - Đặt mắt trái hay 2 mắt vào thị kính đồng thời vặn đinh ốc thứ cấp nâng ống kính lên từ từ và dừng lại khi thấy ảnh rõ. 3. Các bước quan sát mẫu vật dưới kính hiển ở vật kính 40X : mắt vẫn phải đặt vào thị kính vừa quan sát mẫu vật ở vật kính 10X vừa dịch chuyển phần muốn quan sát vào giữa thị trường ,sau đó xoay đĩa mang vật kính sang 40X đến ngay quang trục khi nghe tiếng “ cắt” là được. Vặn đinh ốc vi cấp để điều chỉnh cho thấy rõ nhất. 4. Khi di chuyển từ vật kính 10X sang vật kính 40X không quan sát được ảnh rỏ có thể do : không điều chỉnh tiêu bản vào vị trí thích hợp,ánh sáng không đủ 5. Các bước để lấy tiêu bản ra khỏi kính hiển vi : + Xoay sang vật kính ngắn nhất hay vật kính 10X về ngay quang trục. + Mở bộ phận kẹp và lấy tiêu bản ra khỏi bàn kính. + Lau khô đầu các vật kính và đậy kính hiển vi lại. Trang 6 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM BÀI 2:Cấu tạo tế bào động và thực vật I/ Mục đích yêu cầu - Học cách làm tiêu bản tạm thời các mẫu vật để quan sát dưới kính hiển vi. - Nhận biết được sự khác biệt cơ bản giữa tế bào động vật và tế bào thực vật. - Nhận biết vài bào quan của tế bào động vật và thực vật dưới kính hiển vi như: lục lạp, sắc lạp, bột lạp, không bào co bóp,điểm mắt, nhân,… - Quan sát và vẽ tế bào với các thành phần cấu trúc cơ bản. II/ Vật tư thiết bị và hóa chất - Kính hiển vi - Lame, lamelle - Tăm xỉa răng, kim mũi giáo, kẹp, lưỡi lam - Phẩm nhuộm Lugol (Iodo iodur) - Củ hành tây ( Allium cepa L.) - Trái ớt chín ( Capsicum frutesscens) - Củ khoai tây( Solanum tuberosum) - Rong nhớt( Spirogyra sp) - Paramecium sp – Euglena sp – Phacus sp - Củ cà rốt III/ Các bước tiến hành 1/ Thực hiện tiểu bản để quan sát tế bào thực vật: Trang 7 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Cách thực hiện: - Nhỏ sẵn lên lame ( kính mang vật) một giọt Lugol. - Gở lớp biểu bì mặt trong của vảy hành tây bằng cách: + Dùng lưỡi lam rạch nhẻ lên lớp biểu bì một hình vuông một cạnh 0,5 cm. + Bóp nhẹ thep mặt cong của vảy hành để lớp biểu bì ở mặt trong bong ra khỏi lớp nhu mô bên dưới. + Dùng kẹp gở nhẹ một góc của miếng mẫu để tách lớp biểu bì ra. - Đặt mặt trong của lớp biểu bì tiếp xúc với phẩm nhuộm trên lame. - Đậy lamelle ( kính đậy vật) lại bằng cách: + Đặt một cạnh của lamelle tiếp xúc với rìa của giọt phẩm nhuộm và nghiên một góc 45 0 . + Dùng kim mũi giáo đở cạnh đối diện và hạ từ từ lamelle xuồng ( để tránh có bọt khí) cho đến khi lamelle nằm sát trên lame. Quan sát: - Dưới vật kính 10X, tế bào có hình đa giác dài, vách tế bào và nhân nhuộm màu vàng lợt, chất tế bào dưới dạng lấm tấm màu vàng. - Dưới vật kính 40X, tế bào to hơn với vách tế bào bằng cellaloz dày; nhân thường nằm chênh về một bên trong tế bào chất. 2/ Thực hiện tiêu bản để quan sát tế bào động vật. Cách thực hiện: - Súc miệng cho sạch - Nhỏ sẵn trên giữa lame một giọt lugol - Dung đầu dẹp của tăm xỉa răng gợt nhẹ vào lớp biểu mô phía trong má miệng để lấy tế bào biểu mô. Trang 8 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM - Dầm nhẹ đầu tăm vào giọt phẩm nhuộm trên lame và lậy lamelle lại. Quan sát: Dưới vât kính 10X, tế bào có dạng gần tròn hay hình đa giác không đều hay có khi biến dạng trong quá trình thực hiện tiêu bản do màng tế bào tương đối mỏng. Nhân thường nằm giữa tế bào và có màu vàng đậm hơn tế bào chất. Dưới vật kính 40X, nhân tế bào đồng đều và không gấp nếp để quan sát. Bài phúc trình: 1. Vẽ hình và chú thích đầy đủ chi tiết một tế bào biểu bì vảy hành tây và một tế bào mô má miệng : Hình tế bào biểu bì vẩy hành tây Hình tế bào biểu mô má miệng Trang 9 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Chú thích: Cell wall: vách tế bào Cytoplasm: tế bào chất Nucleus: nhân Cell membrane: màng tế bào 2. Những đặc điểm cơ bản về sự khác biệt cấu tạo giữa tế bào động vật và tế bào thực vật: Tế bào Thực vật Tế bào Động vật Hình dạng tế bào - Có dạng hình bình hành hoặc hình đa giác. - Có dạng bầu. Thành tế bào - Có thành xenlulôzơ. - Không có thành tế bào, không có thành xenlulôzơ. Nếu có thì chỉ là thành gly cocalyx. Trung thể - Không có trung thể. - Có trung thể. Không bào - Có không bào phát triển mạnh. -Không có không bào hoặc nếu có thì rất nhỏ và rất ít khi có không bào. Vị trí của nhân - Ở gần sát vách tế bào. - Ở giữa tế bào. 3. Giải thích sự khác biệt về hình dạng giữa tế bào động vật và tế bào thực vật: - Tế bào thực vật có thành tế bào nên quyết định hình dạng của tế bào. Còn tế bào động vật thì không có thành tế bào nên không có hình dạng xác định. - Tế bào thực vật có không bào lớn chứa nhiều nước, do sức ép của nước nên nhân nằm sát vách tế bào. Bài 3: Tính thấm chọn lọc ở màng tế bào thực vật Trang 10 [...]... tạo ra màu xanh tím Trang 17 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Bài 5: Phân tích thành phần sắc tố của lá cây I/ Mục đích yêu cầu: Màu xanh của lá cây là do 1 hỗn hợp các sắc tố gồm diệp lục tố a, diệp lục tố b và carotenoicd Các thành phần hỗn hợp này có thể được phân tích bằng phương pháp sắc ký trên cột hoặc trên giấy Vị trí của sắc tố (hay các thành phần của hỗn hợp nói chung)... 1cm2) - Dung dịch sinh lí 0.65% NaCl, bông - Giá để treo ếch ( có kim băng ) III/ Tiến hành thí nghiệm: Treo ếch lên giá và tiến hành thí nghiệm theo các bước sau và theo dõi phản ứng trong mỗi thí nghiệm 1.a) Dùng kẹp, kẹp nhẹ một ngón chân phải ếch: chân phải ếch co lên trước, sau đó đến chân trái b) Đặt mảnh giấy lọc có tẩm acid 0.5% vào: Trang 25 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU... III/ Cách bước tiến hành: 1.Ly trích sắc tố Giả 4g lá ngót trong cối sạch và khô Thêm vào 2ml acêton và tiếp tục giả Vắt lấy dung dịch sắc tố dựng trong đĩa petri Cắt giấy thấm thành từng mảnh 2cmx10cm Dùng tăm chấm vào dung dịch sắc tố rồi kẻ 1 đường ngang trên giấy thấm cách cạnh dưới 2cm 2.Sắc ký: Cho aceton vào Becher ngập khoảng 1 – 1,5cm Trang 18 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU... 200 lần 3 Kết quả thực hành: Số lượng hồng cầu nam: 49 N = ( 469 x 4000 x 200) / 80 = 4.690.000 Số lượng hồng cầu nữ: không có mẫu Trang 22 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Bài 7: Phương pháp lấy máu – xác định được tế bào bạch cầu và đếm số lượng bạch cầu trong phòng đếm I/ Mục đích: Biết cách xác định số lượng bạch cầu tong 1mm 3 Đây cũng là một chỉ tiêu sinh lý quan trọng liên... đếm được trong 25 ô nhỏ 4 Kết quả thực hành: B1Nam= 39 tế bào MNam = B1Nam x 200 = 39 x 200 = 7.800 B1Nữ= 42 tế bào MNữ = B1Nữ x 200 = 42 x 200 = 8.400 Trang 24 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Bài 8: Phản xạ-phân tích cung phản xạ-ức chế phản xạ tủy A.Phản xạ và phân tích cung phản xạ: I/ Mục đích: Để hiểu rõ khái niệm phản xạ, những thành phần tham gia vào một phản xạ và... bằng cách tăng tốc độ va chạm giữa ác phân tử Trang 12 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM + Ở nhiệt độ - 100C: nguyên nhân vì sao ở ống nghiệm chứa miếng dền có xử lí -10 0C lại cho màu đậm hơn ống 400C có thể la do tác dụng của nhiệt độ lạnh làm thay đổi tính lỏng của màng tế bào, gây cho màng tế bào mất đi chức năng sinh học • Tác dụng của dung môi hữu cơ: ở ống nghiệm chứa dung... 20 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Bài 6: Phương pháp lấy máu, xác định số lượng tế bào hồng cầu và đếm số lượng tế bào hồng cầu I/ Mục đích yêu cầu: Biết cách làm tiêu bản sát máu để: Tìm hiểu hình dáng cấu tạo của hồng cầu phù hợp với chức năng vận chuyển khí (O 2, CO2) trong quá trình hô hấp Biết phương pháp xác định số lượng hồng cầu trong 1mm 3 máu Đây là một chỉ tiêu sinh. .. đẩy bản thứ 2 thu n chiều nghiêng của bản kính B Đếm số lượng hồng cầu trong phòng đếm: 1 Chuẩn bị: Tráng ống trộn hồng cầu bằng dung dịch chống đông máu Sáu trùng ngón thứ 4 tay trái và kim trích Trích và nặng bỏ giọt máu đầu lau sạch và nặng lấy 1 giọt tròn nhỏ Đặt đầu ống trộn vào giọt máu với một độ nghiêng để máu chuyển vào ống theo sức mao dẫn, Trang 21 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM...BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM I/ Đặc điểm Tế bào, cũng như các bào quan bên trong nó, đều có màng lipoprotein bao bọc, ngăn cách chúng với môi trường xung quanh Màng này, nếu nguyên vẹn vó tính thấm chọn lọc, nhờ đó tế bào giữ được thành phần chất dinh dưỡng hữu cơ và khoáng cần thiết bên trong nó, kiểm... trộn đều với thu c nhuộm trong dung dịch Bỏ một vài giọt đầu rồi nhỏ 1 giọt lên phong đếm Đậy bản kính mỏng, ấn nhẹ cho sát mặt phòng đếm và đặt dưới kính hiển vi Trang 23 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM 3.Tiến hành đếm và tính số lượng bạch cầu: Đếm bạch cầu ở 5 cụm, mỗi cụm 5 ô nhỡ Chọn 4 cụm ở 4 góc phòng đếm và 1 cụm ở giữa Như vậy tổng số ô phải đếm là 25 ơ nhỡ mà mỗi ô con . bì vảy hành tây và một tế bào mô má miệng : Hình tế bào biểu bì vẩy hành tây Hình tế bào biểu mô má miệng Trang 9 BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG –. xuyên thấu. Trang 2 b b’ BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG – NHÓM 4– TIỂU NHÓM Hình 1: Sơ đồ nguyên tắc cấu tạo của kính hiển vi quang học 2.Các bộ phận
